致热适应因子的反相高效液相色谱分离及其降温活性测定

摘要

先前的研究工作曾发现,在热适应兔脑室液中有一种能诱使体温降低的活性物质——致热适应因子(HAIF),经Sephadex G25柱层析分离发现存在于P_4组分中。本研究用RP-HPLC进一步从G25-P_4组分中分离出HAIF。活性检测表明,其中保留时间4.61 min的RP-HPLC_3明显降低丘脑下部前区注射兔的肛温。经Waters 990+光电二极管检测的RP-HPLC_3三维图鉴定为色谱纯。RP-HPLC_3的剂量-效应曲线呈高度拟合的抛物线相关;丘脑下部前区注射的适宜剂量相当于3.4～7.2×10^(-10)g HAIF。这些结果证明,RP-HPLC分离得到了高纯度、高效价的HAIF。