孕前接种人巨细胞病毒pp65DNA疫苗对阻断小鼠人巨细胞病毒宫内传播的效果

摘要

目的探讨构建的人巨细胞病毒(HCMV)pp65 DNA疫苗能否阻断HCMV宫内垂直传播及其免疫机制。方法24只6～8周龄健康雌性Balb/c小鼠随机分为A、B二组,每组12只。A组为疫苗组,B组为对照组。A组于0、2、4周各注射pp65DNA疫苗200μg,B组同期注射9g/L盐水0.3mL。末次接种后,各组与雄鼠配笼,妊娠d3孕鼠分别注射HCMVAD169株悬液,d20仔鼠经剖宫产娩出。荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定孕鼠血清HCMVDNA载量,应用流式细胞仪技术、放射免疫法、酶联免疫吸附(ELISA)法测定其血清CD3+、CD4+、CD8+及IL-2、IFN-γ水平,比较二组间差异;比较二组孕鼠死胎率及1周内仔鼠病死率、仔鼠脑组织病理改变及血清HCMVDNA检出率。结果1.A组孕鼠死胎率及1周内仔鼠病死率分别为13.4%、3.45%,明显低于B组(54.2%、40.74%),其差异有显著性(Pa<0.01);2.A组孕鼠血清HCMVDNA拷贝数(100mg)-1为932.80±89.62,明显低于B组(387547.6±49721.07)(P<0.01);3.A组孕鼠血清CD3+、CD4+、CD8+、IL-2、IFN-γ水平明显高于B组,差异均有显著性(Pa<0.01);4.B组仔鼠脑组织有明显病理改变,A组则无;5.A组仔鼠血清HCMVDNA检测均阴性,B组检出8/12例阳性。结论pp65DNA疫苗可能通过增强孕鼠的免疫功能,尤其是细胞免疫水平阻断HCMV宫内垂直传播。