不同浓度脂多糖对大鼠肠上皮细胞增殖和白细胞介素-6、白细胞介素-1β及肿瘤坏死因子-α分泌的影响

摘要

目的 探讨不同浓度脂多糖（LPS）对大鼠肠上皮细胞（IEC-6）增殖和白细胞介素（IL）-6、IL-1β及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）分泌的影响.方法 体外培养的IEC-6分为正常对照组（0 mg/L,A组）、0.1 mg/L组（B组）、0.5 mg/L组（C组）、1.0 mg/L组（D组）、5.0 mg/L组（E组）和10.0 mg/L组（F组）,分别用对应浓度的LPS与细胞共培养3h、5h、7h后,噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖率,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清中IL-6、IL-1β及TNF-α的质量浓度.结果 LPS与IEC-6共培养3h、5h、7h时,随着LPS浓度的增加,IEC-6的增殖率逐渐降低.共培养3h和5h时,B组、C组、D组、E组和F组增殖率分别与A组比较,差异均无统计学意义（P均＞0.05）;共培养7h时,B组、C组、D组增殖率与A组比较,差异均无统计学意义（P均＞0.05）,E组、F组增殖率与A组相比,差异有统计学意义（t=4.216,P=0.014;t=14.991,P=0.000）.E组和F组共培养7h时的细胞增殖率较共培养5h时降低,差异均有统计学意义（t=2.576,P=0.033;t2.975,P=0.018）;而共培养5h时E组与A组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.LPS与IEC-6共培养3h、5h和7h时,B组、C组、D组、E组和F组共培养上清中IL-6水平与A组比较均有升高,差异均有统计学意义（P均＜0.01）,其中各时间点E组IL-6水平均最高.E组LPS与IEC-6共培养5h时IL-6水平出现峰值.LPS与IEC-6共培养3h、5h和7h时,B组、C组、D组、E组、F组共培养上清中IL-1β、TNF-α水平与A组比较,差异均无统计学意义（P均＞0.05）.结论 在一定浓度、一定培养时间范围内,随LPS浓度的增加,IEC-6增殖率呈下降趋势.0-10.0 mg/L的LPS与IEC-6共培养,可刺激IEC-6分泌IL-6.5.0 mg/L的LPS与IEC-6共培养5h,其培养上清中IL-6水平最高.LPS对IEC-6培养上清中TNF-α和IL-1β水平无影响.5.0 mg/L的LPS与IEC-6共培养5h可制作较好的IEC-6炎性模型.