T淋巴细胞耗竭在耐多药肺结核患者免疫表达中的初步研究

摘要

目的 探讨T淋巴细胞耗竭在耐多药肺结核(multidrug-resistant pulmonary tuberculosis,MDR-PTB)患者外周血分离流式细胞术检测后免疫表达中的特征.方法 采用前瞻性研究的方法,选取2020年1-8月同济大学附属上海市肺科医院住院治疗的58例肺结核患者作为研究对象,其中,MDR-PTB患者20例(MDR-PTB 组),药物敏感性肺结核(drug susceptible pulmonary tuberculosis,DS-PTB)患者38例(DS-PTB 组);同期纳入健康志愿者20名,作为健康对照组(HD组).分别采集各组研究对象肘部静脉血各10 ml并抗凝处理,分离其外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear,PBMC),利用流式细胞术检测并比较其结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)抗原特异性CD4+和CD8+T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1(PD-1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)和淋巴细胞活化基因-3(Lag-3)等抑制性受体的表达水平,以及胞内细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-a(TNF-α)的分泌水平.结果 MDR-PTB组CD4-PD-1、CD8-PD-1、CD4-Tim-3和 CD8-Tim-3的表达水平[中位数(四分位数)][分别为24.50％(21.58％,26.00％)、19.95％(16.10％,21.65％)、3.75％(3.20％,4.68％)和 12.65％(10.65％,14.10％)]均明显高于 HD 组[分别为13.10％(11.80％,17.80％)、12.55％(9.61％,18.18％)、0.67％(0.46％,2.41％)和 3.78％(2.35％,6.55％)]和DS-PTB组[分别为 14.50％(11.90％,20.00％)、13.20％(8.61％,18.23％)、1.12％(0.71％,3.36％)和3.59％(2.10％,7.52％)],差异均有统计学意义(Z 值分别为-4.009、-4.159,-3.027、-3.284,-3.565、-3.967,-5.568、-3.261,P 值均＜0.05).MDR-PTB 组 CD4-IL-2和 CD8-IL-2分泌水平[分别为 1.30％(0.73％,2.71％)和2.27％(1.03％,3.11％)]均明显高于 HD 组[分别为0.67％(0.44％,1.10％)和0.59％(0.39％,0.91％)],差异均有统计学意义(Z=-2.670、-3.917,P 值均＜0.05).DS-PTB 组 CD4-IFN-γ分泌水平[0.92％(0.59％,2.02％)]明显高于 HD 组[0.65％(0.38％,0.82％)],MDR-PTB 组和 DS-PTB 组 CD8-IFN-γ 分泌水平[分别为 1.16％(0.53％,2.03％)和 1.80％(0.97％,3.04％)]均明显高于 HD组[0.69％(0.35％,0.91％)],差异均有统计学意义(Z值分别为-2.337、-1.988、-4.455,P值均＜0.05).DS-PTB组CD4-TNF-α分泌水平[0.83％(0.67％,1.22％)]明显高于 HD组[0.44％(0.28％,0.71％)]和 MDR-PTB组[0.41％(0.28％,0.82％)],差异均有统计学意义(Z值分别为-3.903、-2.919,P值均＜0.05).结论 MDR-PTB患者存在T淋巴细胞功能耗竭,阻碍了T淋巴细胞免疫效应的表达.