聚合酶链反应-增强化学发光法快速检测结核杆菌的研究

摘要

目的建立聚合酶链反应-增强化学发光法(polymerase chain reaction-enhanced chemiluminecence,PCR-ECL)快速高灵敏度和高特异性检测结核杆菌的方法.方法以结核分支杆菌、牛分支杆菌特异性抗原Pab基因的419bp片段为靶序列,PCR体系经优化,直接酶标法标记探针,增强化学发光检测(ECL)进行分子杂交.结果 PCR体系对结核分支杆菌、牛分支杆菌、卡介苗的扩增为阳性,PCR体系灵敏度为5fg DNA分子.ECL体系灵敏度为0.5pg DNA分子.采用模拟痰样,可检至10个以下结核杆菌.结论建立了结核杆菌的PCR-ECL快速检测方法,整个过程可在一天半内完成.