基于“碘-罗丹明B”缔合物荧光探针测定β-内酰胺酶活性

摘要

碘(I3-)对罗丹明B(RB)具有荧光猝灭作用,可使RB的荧光信号强度减弱甚至消失,而β-内酰胺酶作用下的青霉素水解产物青霉噻唑酸可将I3-还原为I-,使体系荧光信号再现,据此建立了以碘-罗丹明B缔合物为荧光探针测定药剂中青霉素含量的新方法.在激发波长360nm,发射波长580nm条件下进行了β-内酰胺酶活性的荧光测定.结果 表明,在0～2.4U/mL范围内,β-内酰胺酶活性与其荧光强度变化值呈良好的线性关系,检出限为0.002U/mL.方法 的加标回收率为96,67％～103.3％,相对标准偏差(n=6)2.0％～4.5％.该方法简便快速、准确可靠、灵敏度高,成功用于自制酶液酶活性测定.