利福布丁中微量未知杂质的量与其 HPLC峰面积线性关系的探讨

摘要

目的考察利福布丁中微量未知杂质量与其 HPLC峰面积的线性关系.方法色谱柱为 Hypersil- C18 ( 4.6mm× 150mm, 5μ m) ;流动相为磷酸二氢钾( 13.6g/L)-乙腈( 50∶ 50)混合后以 2mol/L氢氧化钠调 pH为 6.5± 1,检测波长 254nm.配制利福布丁不同浓度梯度的溶液( 0.09～ 2.2mg/ml),并分别进样 10μ l,读取被考察杂质的峰面积.设 0.09mg/ml溶液中被测杂质的量为 x0,则其它溶液中该杂质的量分别为 2x0～ 24.44x0.求出该杂质的量(以 x0的系数代替)与其色谱峰面积的回归方程的相关系数.结果在杂质浓度约 0.36～ 8.8μ g/ml范围内,相关系数为 0.9997.结论在上述浓度范围,该杂质的量与其色谱峰面积呈很好的线性关系.同时,相关系数 r的数学推导过程表明, r只与 x0的系数有关,而与 x0无关.因此,这种相关系数的求算方法科学、可靠且简单、直接(无需使用杂质单体),为其他药品中未知杂质的线性关系考察提供了一种新的途径.