Real-Time PCR和组织原位杂交法检测enJSRV在绵羊胎儿免疫器官及肺脏中的表达

摘要

本研究旨在揭示感染JSRV病羊体内检测不到循环抗体的免疫学机理.用地高辛(DIG)标记制备enJSRV-env探针,原位杂交法检测妊娠70 d的绵羊胎儿(免疫器官初步形成期)、妊娠130 d胎儿(即将出生的)和出生7日龄羔羊的胸腺、脾脏、肠淋巴结和肺脏内enJ SRV mRNA表达情况.并利用Real-Time PCR法,对enJSRVmRNA在以上组织中的表达进行定量分析.结果表明,在所检测组织内均有阳性信号出现,而阴性对照组均没有阳性信号;enJSRV mRNA在胎儿和初生羔羊各免疫器官高水平表达,特别是在妊娠130 d胎儿和初生7日龄羔羊的胸腺和脾脏中表达水平比较高,而在各时期的肺脏组织中都检测到低水平表达.本试验结果为机体对exJSRV的感染产生免疫耐受这一假说提供了有力的证据.