LPS通过AKT/FOXO1信号通路诱导C2C12肌管细胞MuRF1基因转录

摘要

以C2C12肌管细胞为试验材料,探讨脂多糖(LPS)诱导的炎症反应对肌管蛋白降解相关基因及信号通路的影响.选取不同质量浓度(10、100、1 000 ng· mL-1)的LPS分别刺激C2C12肌管细胞30 min和3h,通过RTqPCR检测炎症因子TNF-α和IL-6的基因转录,确定LPS最佳刺激浓度以建立细胞炎症模型.用最佳浓度LPS分别刺激C2C12肌管细胞0min、30 min、1h、3h、6h、12 h、24 h,RT-qPCR检测MAFbx基因和MuRF基因在不同时间点的转录量变化.此外,1 000 ng·mL-1 LPS刺激C2C12肌管细胞12 h后,Western blot检测AKT/FOXO1、mTOR和P38信号通路相关蛋白质的表达情况.结果表明:LPS刺激C2C12肌管细胞的最佳浓度为1 000 ng·mL-1,在作用30 min和3h时均能显著上调TNF-α、IL-6的基因转录,而在刺激12和24 h时MuRF1、IL-1β、IL-6和TLR4的基因转录显著上调.此外,1 000 ng· mL-1 LPS刺激C2C12肌管细胞12 h时,仅AKT和FOXO1蛋白磷酸化水平明显降低.基于以上结果,推测LPS通过调控AKT/FOXO1信号通路诱导C2C12肌管细胞MuRF1转录.