ssc-let-7c对猪甲状腺细胞体外培养增殖研究

摘要

MiR-let-7c是let-7家族的主要成员之一,在甲状腺的生长发育过程中起着重要的作用.本实验通过体外转染miR-let-7c类似物探索其对猪甲状腺细胞体外培养增殖的影响.观察猪甲状腺细胞在3D条件下的生长状况和猪甲状腺原代及传代细胞的形态变化,并计算细胞生长速度;通过实时荧光定量(qPCR)、MTT技术检测3组体外培养猪甲状腺细胞中miR-let-7c的表这量和细胞增殖情况;利用在线预测软件miRWalk2.0对miR-let-7c的靶基因及其功能进行预测.结果表明:传代2代后的甲状腺细胞生长缓慢,且形态由圆逐渐变长.细胞免疫荧光鉴定结果发现有明显的绿色荧光,表明猪甲状腺细胞功能正常.荧光定量PCR结果显示管家基因Met-tRNA表达稳定,转染mimics组miR-let-7c表达量明显高于其他2组.利用MTT法的细胞增殖实验中转染mimics组的OD值显著小于其他2组(P＜0.05).利用在线预测软件发现miR-let-7c的靶基因主要聚集在与胰岛素及癌症等相关的通路.本研究揭示了miR-let-7c在甲状腺细胞生长过程中的重要作用,为研究miR-let-7家族在调控猪生长发育过程中的作用提供了有益参考.