伊氏锥虫对安锥赛抗药性的分子基础初探

摘要

为了探讨伊氏锥虫对安锥赛抗药性的分子基础,将伊氏锥虫单虫克隆,一部分克隆锥虫通过28只免疫抑制小白鼠,用安锥赛亚治疗剂量治疗,使其产生抗药性,为抗药锥虫;另一部分克隆锥虫也通过28只免疫抑制小白鼠,但不用药物治疗,为敏感锥虫,即对照.用体外生长抑制法测得抗药和敏感锥虫的IC50分别为43.8和0.16878μg/mL.分别提取它们的总RNA和mRNA,总RNA分离出3条带,即从电泳的阴极到阳极分别为26s、21s和5s,mRNA主要分布在21sRNA之后.用抑制性消减杂交法,以敏感锥虫的cDNA为试验组(Tester),抗药锥虫的cDNA为驱动组(Driver),共挑选出34个阳性克隆.以cDNA来合成探针,用Southem dot blot鉴定,其中18个片段所在的基因是由于抗药性产生而表达量降低,这18个片段长度为300～700bp.