伊氏锥虫

摘要： 牛伊氏锥虫病是由伊氏锥虫寄生于牛血液中而引发的一种急性或慢性血液寄生虫病,呈全世界流行,感染牛主要临床表现是贫血、消瘦、机体衰弱,目前还没有商品化的疫苗能够预防.预防该病主要靠加强牛场管理,搞好牛场内外环境卫生,杀灭各种上媒介昆虫.其主要治疗药物是三氮脒,治疗原则是尽早发现、尽早隔离、尽早治疗,同时加强护理.

摘要： 为了解伊犁河谷区域虻的分布及其携带伊氏锥虫的情况,通过对虻的形态学鉴定及其特异性基因(CO1)和携带病原18S rRNA基因扩增、测序、同源性比对,鉴定和检测了采自伊犁河谷区域的虻及其携带病原情况.结果 显示,所采集的虻为原虻属秋季原虻种,PCR扩增虻CO1基因和马伊氏锥虫18S rRNA基因序列分别为653 bp和205 bp.结果 发现,秋季原虻的CO1基因与已发表的丹麦株(MT584147.1)同源性为98％,与形态学鉴定结果一致.在156只秋季原虻中携带伊氏锥虫的有9只,阳性率为5.7％00(9/156),其阳性条带基因序列与GenBank中已发表的伊氏锥虫基因同源性为99％.试验结果表明,结合形态学分类和分子生物学方法对虻样品进行鉴定操作简单、准确度高.

摘要： 锥虫病是世界卫生组织认定的由锥虫引发的主要的人畜共患原虫病之一.在我国流行的主要是骆驼、马、牛等家畜的伊氏锥虫病.骆驼锥虫病可造成骆驼日渐消瘦、心肌衰竭甚至死亡,随着疾病的蔓延会造成较大的经济损失.通常使用苏拉明、贝尼尔、安锥赛等药物可达到防治该病的目的.为了让更多的人们较为系统地了解和有效防治骆驼锥虫病,从骆驼锥虫病的病原体特征、流行病学、临床症状、病理变化和防治措施等方面进行了综述.此外,对骆驼锥虫病的防治提出了新的方法和思路,为骆驼锥虫病的诊断、治疗及预防提供参考.

摘要： 本文主要介绍了奶牛伊氏锥虫病的流行情况、流行特点、症状、诊断、治疗、预防和净化,加强饲养管理、配合治疗能提高机体抵抗力,增强药物疗效.通过多年的防治与净化,基本消灭了此病.

摘要： 利用环状介导等温DNA扩增法快速、准确的诊断出伊氏锥虫.采奎屯某团场待宰牛的血样,用FAT卡提取DNA,再通过环状介导等温DNA扩增法扩增.结果显示感染率为15.4％.环状介导的等温扩增(LAMP)是核酸扩增的一种新方法,该方法在等温条件下能高特异生、高效、快速地扩增DNA.

摘要： 伊氏锥虫病又被称为苏拉病,是一种原虫病,是因为伊氏锥寄生在马属动物、牛、骆驼等动物的血液中所引发的.在文中主要就针对骆驼伊氏锥虫病的诊断以及治疗方法进行分析探讨.

摘要： 牛伊氏锥虫病是由伊氏锥虫引起的一种寄生虫病,主要寄生在牛的血液中,且随着血液中伊氏锥虫繁殖的逐渐旺盛,大量的寄生虫会跟随血液的流动进入各大组织器官.本文针对牛伊氏锥虫病的发病症状、病理变化、诊断依据、预防措施以及治疗方案等方面进行论述.

摘要： 试验旨在建立一种能鉴定水牛临床感染伊氏锥虫的方法.试验以纯化的伊氏锥虫3D7腹水单抗作为包被抗体,HRP标记的伊氏锥虫5B9单抗作为第2抗体,建立了检测伊氏锥虫变异表面糖蛋白(variant surface glucoprotein,VSG)抗原的双抗体夹心ELISA方法,并进行了灵敏度、特异性试验及初步检测应用试验.结果显示,用该法检测阳性血清,1∶3200稀释时其D450nm值仍大于阴阳临界值;交叉反应试验结果显示,其不与泰勒虫、弓形虫、衣原体、大片吸虫等抗原发生交叉反应,表明该法具有良好的检测特异性;用该法检测了当地82份水牛血清,阳性率为9.76％.结果表明本研究建立的伊氏锥虫VSG抗原双抗体夹心ELISA方法检测灵敏度高、特异性好,能作为检测水牛临床感染伊氏锥虫的有效方法,对于临床伊氏锥虫病的诊断和防控具有重要意义.

摘要： 为了解上海地区马梨形虫病和伊氏锥虫病的存在情况，我们从上海地区选择9家马场，共采集马血样219份，分别采用商品化ELISA试剂盒和平板凝集试剂盒检测马梨形虫病和马伊氏锥虫病抗体。结果显示，219份血清中，马梨形虫病抗体阳性血清有64份，分布于8家马场，平均阳性率为29．2％；马伊氏锥虫病抗体阳性血清有6份，分布于3家马场，平均阳性率为2．7％。调查数据表明，上海地区马梨形虫病感染率较高，需要加强对该病的防控，同时也要对马伊氏锥虫病进行监测。

摘要： 奶牛伊氏锥虫病是由伊氏锥虫侵入奶牛血液引起的鞭毛虫病。总结了该病的病原体、临床症状、诊断方法，并提出了相应的防治措施。

摘要： 目前,有关端粒和端粒酶的研究已经成为生命科学研究的热点之一.而寄生虫防治过程中存在的一个非常棘手的问题就是耐药虫体和虫株的不断出现,严重影响抗寄生虫药和驱虫药的效果.以寄生虫的端粒和端粒酶为切入点,进而分离端粒结合蛋白并针对该蛋白设计药物或疫苗无疑为寄生虫病的预防和治疗开辟了新思路.本研究以伊氏锥虫为研究对象,采用iCODEHOP方法根据已登录GenBank其他球虫目原虫端粒酶逆转录酶(TERT)基因序列设计简并引物PCR同时结合3’、5’-RACE技术,成功克隆T.evansi TERT 3966bp全长cDNA序列,其中包括3579bp的ORF编码1497个氨基酸,同时含有273bp 5'UTR和114bp 3'UTR以及11bp多聚腺苷酸尾.利用生物信息学分析软件分析表明该基因包含TERT家族的主要特征性基序,包括motifs GQ,CP,QFP,T和motifs 1,2,A,B,C,D和E.

摘要： 用伊氏锥虫优势变体(Hb Tat1.18)纯化抗原作为免疫原免疫小鼠，利用淋巴杂交瘤融合技术，筛选出两株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为3D7、589。经间接EUSA检测3D7、589杂交瘤细胞培养上清效价和腹水效价，其中细胞培养上清效价分别为1：6400和1：12800，腹水效价分别为1：105和1：106。单抗的亚型鉴定结果表明，3D7、589分泌的抗体都为IgG1亚类K链。应用589株杂交瘤细胞纯化的单克隆抗体，建立了检测伊氏锥虫分泌抗原的双抗体夹心ELISA检测方法，并利用该方法初步检测了采自广西部分地区的水牛血清样品，结果在各地采集的样品中均检出阳性血清，阳性率为6.8％，说明广西各地水牛均存在伊氏锥虫现症感染。伊氏锥虫单克隆抗体的制备以及双抗体夹心ELISA检测方法的建立为水牛伊氏锥虫的病原学、免疫学研究以及本地区水牛伊氏锥虫病的监测、诊断和防控提供了有力的技术支持。

摘要： 利用两株伊氏锥虫的核糖体基因内转录间隔区(ITS1-5.8S-ITS2)的序列分析和系统进化学分析来研究来两株水牛伊氏锥虫的分类学地位。通过对我们从水牛分离到的锥虫(广西株)和湖北株水牛伊氏锥虫的ITS基因的扩增、克隆和测序及分析并用CLUSTALW1.83软件多重比对分析序列的差别，MEGA4.0软件处理数据绘制系统进化树。结果表明，这两种水牛伊氏锥虫的ITS1-5.8S-ITS2 rRNA基因大小分别为1102bp和1095bp，两种伊氏锥虫的ITS序列存在多态性，其中广西株的ITS-1序列长为340bp，ITS-2序列长为582bp，湖北株的ITS-1序列长为339bp，ITS-2序列长为587bp。系统发育分析显示，这两株伊氏锥虫分布在同一大枝的不同亚群上。

摘要： 微管相关蛋白已成为热门的候选抗原分子或药物作用靶子.根据已报道的布氏锥虫(Trypanosoma brucei)微管结合蛋白p15(Tb-MAP p15)基因及其3'非翻译区保守序列设计引物，采用PCR法从伊氏锥虫云南水牛株(Trypanosoma evansi YNB)基因组DNA中首次克隆得到伊氏锥虫微管结合蛋白p15(Te-MAP p15)基因.克隆片段长273bp，编码90个氨基酸，预测分子量9.0kD.经同源性比较，与Tb-MAP p15基因同源率达到94％.抗原性分析Te-MAP p15基因表达的氨基酸序列比T.brucei多5个，均参与组成其中一个抗原决定簇，并且此抗原决定簇序列形成在蛋白中常作为识别位点的α螺旋.将该基因亚克隆到pGEX-6P-1原核表达载体，转化大肠杆菌(Escherichia coli)RS21宿主菌，经IPTG诱导，可成功表达.重组融合蛋白大小为35kD，与预期大小一致，经SDS-PAGE和Western-blot鉴定为重组伊氏锥虫云南水牛株p15蛋白.

摘要： 将编号为01,02,03,04,05的五个伊氏锥虫克隆群体(实验室保存)以10条/只经耳静脉接种至新西兰大白兔体内,免疫荧光试验检测抗体滴度达到最高后,开始耳静脉采血并提取抗血清,之后每隔两天提取一次抗血清,共提取10次,50份血清等量(各占1/50)混合,称为抗活体锥虫血清"抗体库B";此外取BeTat1.1,BeTat1.2……BeTat1.19,BeTat1.20共计20个抗原变异体(实验室保存)以10条/只经耳静脉接种至新西兰大白兔体内,免疫荧光试验检测抗体滴度达到最高后,心脏采血,分离血清,20份血清等量(各占1/20)的比例混合,称为抗活体锥虫血清"抗体库A";取将编号为01的伊氏锥虫克隆群体以100条/只分别腹腔注射接种小鼠和大鼠,见虫后分别使用抗活体锥虫血清"抗体库B"和抗活体锥虫血清"抗体库A"进行治疗;结果显示"抗体库B"治疗组的小鼠治愈率为93.75﹪,大鼠的治愈率达到了100﹪,"抗体库A"的治疗效果则不明显.

摘要： 将伊氏锥虫云南水牛株(Trypanosoma evansi stock YN)的克隆群体以10条/只经耳静脉接种一只新西兰大白兔后,每3天从兔耳静脉采血,分离一次虫体,并将所采虫体经昆明系小鼠进行单虫克隆,置于-196°C液氮中保存.每只兔子在采集完10个克隆群体后,将第10个克隆群体同样以10条/只经耳静脉接种给另一只新西兰大白兔,继续采集另外10个克隆群体,连续传5只新西兰大白兔,共获得50个克隆群体.用50只新西兰大白兔制备这50个克隆群体相应的50个特异性抗血清,将50个克隆群体与所有抗血清进行间接免疫荧光试验(IFT)及ABC酶标试验(ABC-ELI),鉴定出这50个克隆群体实际是20个抗原变异体(命名为BeTat1.1、1.2、1.3……1.20,其中三个抗原变异体BeTat1.18、BeTat1.19、BeTat1.20几乎与所有抗血清有阳性反应,认为它们为这一虫株的"代表变体".

摘要： 为探讨伊氏锥虫对安锥赛抗药性的分子机理,以已报导的布氏锥虫对砷剂药物抗药性相关的TbTA1基因设计引物,以不同退火温度(55°C、57°C、60°C、63°C和65°C)和不同DNA聚合酶(Clontech的50×Advantage Poly-merase Mix和上海生物工程公司的Taq聚合酶),分别从伊氏锥虫敏感株(C03)的cDNA和基因组DNA中分离出TbTA1基因的全长序列,而从抗药株(C7)的cDNA和基因组DNA中都没分离出TbTA1基因,这表明抗药株的Tb-TA1已发生改变；根据TbTA1的5'端和1041端设计引物,从敏感株和抗药株都分离到约1000bp的片段,这表明因安锥赛抗药性的产生而TbTA1的改变主要发生在TbTA1的1042-1415部分.由此确定TbTA1与伊氏锥虫的安锥赛抗药性有关.将伊氏锥虫敏感株的TbTA1克隆、测序,其序列与布氏锥虫TbTA1序列比较,它们有10个碱基不同,即第88位的G(T.e)-A(T.b)、第144位的T(T.e)-C(T.b)、第224位的C(T.e)-T(T.b)、第471位的C(T.e)-T(T.b)、第472位的A(T.e)-G(T.b)、第549位的G(T.e)-T(T.b)、第1008位的C(T.e)-T(T.b)、第1033位的A(T.e)-G(T.b)、第1293位的A(T.e)-G(T.b)和第1384位的T(T.e)-C(T.b),其中有5个碱基所编码的氨基酸不同,即Val30(T.e)-Ile(T.b)、Ala75(T.e)-Val(T.b)、Ile158(T.e)-Val(T.b)、Thr345(T.e)-Ala(T.b)和Ser462(T.e)-Pro(T.b),这表明伊氏锥虫与布氏锥虫的TbTA1差异可能是它们的种间差异.

摘要： 本申请涉及分子生物学检测技术领域，提供了一种等温扩增检测布氏锥虫种及布氏锥虫亚种(布氏冈比亚锥虫、布氏罗德西亚锥虫)的试剂、试剂盒及其应用，所述试剂包括如下用于检测布氏锥虫种及布氏锥虫亚种(布氏冈比亚锥虫、布氏罗德西亚锥虫)的SEQ ID No.1～SEQ ID No.18的环介导等温核酸扩增引物组，用于检测布氏锥虫种及布氏锥虫亚种(布氏冈比亚锥虫、布氏罗德西亚锥虫)灵敏度高，重复性好、假阴性及假阳性低，检测准确率高，还能够实现通过裸眼观察颜色变化而直接进行结果判断。

摘要： 本发明公开一种伊氏锥虫与路氏锥虫二重PCR鉴别检测试剂盒，用于伊氏锥虫与路氏锥虫快速PCR检测，本发明还提供了该试剂盒的制备方法，利用二重PCR特异性检测方法，根据伊氏锥虫和路氏锥虫种特异基因序列设计引物，通过优化PCR反应体系和条件来提高其敏感性，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后观察结果。本发明可同时对伊氏锥虫和路氏锥虫进行快速准确的检测与鉴别，具有简单方便、灵敏度高、特异性强等特点。

摘要： 本发明公开了针对于伊氏锥虫（Trypanosoma evansi）变异表面糖蛋白（VSG）表位的纳米抗体，同时还公开了编码该纳米抗体的基因序列以及表达该纳米抗体的宿主细胞。通过本发明所公布的纳米抗体基因序列及宿主细胞，该纳米抗体能够在大肠杆菌内高效表达，应用于锥虫检测试剂的研发。

摘要： 本发明涉及生物技术领域中寄生虫病的快速检测技术，公开一种伊氏锥虫的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。该方法包括两对用于检测伊氏锥虫的环介导等温扩增引物FIP、BIP、F3与B3，和一种利用上述两对引物检测伊氏锥虫的LAMP方法，其中包括反应模板的制备、LAMP反应体系、LAMP反应程序和检测结果判断。其操作简便、成本低廉，结果易于观察，非常适用于畜牧饲养场等对于伊氏锥虫的现场快速检测。

摘要： 本发明公开一种伊氏锥虫与路氏锥虫二重PCR鉴别检测试剂盒，用于伊氏锥虫与路氏锥虫快速PCR检测，本发明还提供了该试剂盒的制备方法，利用二重PCR特异性检测方法，根据伊氏锥虫和路氏锥虫种特异基因序列设计引物，通过优化PCR反应体系和条件来提高其敏感性，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后观察结果。本发明可同时对伊氏锥虫和路氏锥虫进行快速准确的检测与鉴别，具有简单方便、灵敏度高、特异性强等特点。

摘要： 本发明公开了一种检测伊氏锥虫的引物对及其检测方法和试剂盒，通过针对

摘要： 本发明涉及生物技术领域中寄生虫的快速检测技术，公开一组伊氏锥虫缺失RoTat1.2基因变异株的环介导等温扩增（LAMP）检测中的特异性引物。包括两对用于检测伊氏锥虫的环介导等温扩增引物FIP、BIP、F3与B3，和一种利用上述两对引物检测伊氏锥虫的LAMP方法，其中包括反应模板的制备、LAMP反应体系、LAMP反应程序和检测结果判断。其操作简便、成本低廉，结果易于观察，特异性针对伊氏锥虫中缺失RoTat1.2基因的变异株检测。

摘要： 本发明公开了针对于伊氏锥虫（Trypanosoma evansi）变异表面糖蛋白（VSG）表位的纳米抗体，同时还公开了编码该纳米抗体的基因序列以及表达该纳米抗体的宿主细胞。通过本发明所公布的纳米抗体基因序列及宿主细胞，该纳米抗体能够在大肠杆菌内高效表达，应用于锥虫检测试剂的研发。

摘要： 一种检测伊氏锥虫（Trypanosoma evansi）变异表面糖蛋白（VSG）抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附测定（double antibody sandwich ELISA）试剂盒，由包被有3D7单克隆抗体的多孔板，辣根过氧化物酶（HRP）标记的5B9单克隆抗体，和显色底物3'，3'，5，5'-四甲基联苯胺（TMB）组成。上述试剂盒的制备方法有以下工艺步骤：（1）制备包被有3D7单克隆抗体的多孔板；（2）制备辣根过氧化物酶（HRP）标记的5B9单克隆抗体检测液：（3）配备显色底物3'，3'，5，5'-四甲基联苯胺。

摘要： 本发明涉及生物技术领域中寄生虫病的快速检测技术，公开一种伊氏锥虫的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。该方法包括两对用于检测伊氏锥虫的环介导等温扩增引物FIP、BIP、F3与B3，和一种利用上述两对引物检测伊氏锥虫的LAMP方法，其中包括反应模板的制备、LAMP反应体系、LAMP反应程序和检测结果判断。其操作简便、成本低廉，结果易于观察，非常适用于畜牧饲养场等对于伊氏锥虫的现场快速检测。