七氟烷致神经元损伤的机制:Tau蛋白磷酸化与含18 kDa片段的载脂蛋白E的关系

摘要

目的 评价Tau蛋白磷酸化与含18 kDa片段的载脂蛋白E(ApoE)的关系,探讨七氟烷致神经元损伤的机制.方法 将培养至第5天的ApoE3型和ApoE2型人源化胎鼠原代神经元,各24皿,分别采用随机数字表法分为4组(n=12)∶ApoE3对照组(A3C组)、ApoE3七氟烷组(A3S组)、ApoE2对照组(A2C组)和ApoE2七氟烷组(A2S组).A3S组和A2S组给予21％氧气+5％二氧化碳+4.1％七氟烷连续4h处理,A3C组和A2C组只给予21％氧气+5％二氧化碳处理.随后提取细胞蛋白采用Western blot法检测全长ApoE、含18 kDa片段的ApoE、AT8和PHF1表达,RT-PCR法检测ApoE mRNA表达,ELISA法检测上清液TNF-α及IL-6浓度.结果 与A2C组比较,A2S组神经元ApoE mRNA和全长ApoE表达上调(P＜0.05),AT8和PHF1表达、上清液TNF-α和IL-6浓度差异无统计学意义(P＞0.05);与A3C组比较,A3S组神经元ApoE mRNA、全长ApoE、含18 kDa片段的ApoE、AT8和PHF1表达上调,上清液TNF-α和IL-6浓度升高(P＜0.05).结论 七氟烷可能通过上调含18 kDa片段的ApoE表达,促进Tau蛋白磷酸化,增加炎症反应,导致神经元损伤.