机械牵张预处理对机械通气性牵张诱导人肺泡Ⅱ型上皮细胞NF-κB和STAT3信号通路活化的影响

摘要

目的探讨机械牵张预处理对机械通气性牵张诱导人肺泡Ⅱ型上皮细胞NF-κB和信号转导及转录激活因子3（STAT3）信号通路活化的影响。方法采用随机数字表法,将人肺泡Ⅱ型上皮细胞株（A549细胞）分为3组（n=24）:对照组（Ⅰ组）:常规培养,未进行机械通气性牵张;机械通气性牵张组（Ⅱ组）:给予20%应变率的机械牵张6 h;机械牵张预处理组（Ⅲ组）:给予5%应变率的机械预牵张60 min后,将应变率调整为20%牵张6 h。机械牵张频率0.3 Hz,载人波形为正弦波。处理结束后消化收集细胞,采用甲基噻唑蓝法测定细胞活力,采用比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）释放率,采用ELISA法测定细胞培养液TNF-α、IL-8及高迁移率族蛋白1（HMGB1）浓度;采用Western blot法测定总NF-κB、磷酸化NF-κB、总STAT3和磷酸化STAT3表达水平,并以磷酸化NF-κB与总NF-κB的比值及磷酸化STAT3与总STAT3的比值分别反映其活化水平。结果与Ⅰ组相比,Ⅱ组和Ⅲ组细胞活力降低,LDH释放率升高,细胞培养液TNF-α、IL-8及HMGB1浓度、NF-κB及STAT3活化水平升高（P＜0.05）;与Ⅱ组相比,Ⅲ组细胞活力升高,LDH释放率降低,细胞培养液TNF-α、IL-8及HMGB1浓度、NF-κB及STAT3活化水平降低（P＜0.05）。结论机械牵张预处理减轻机械通气性牵张诱导人肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的机制与抑制NF-κB和STAT3信号通路活化有关。