异丙酚对内毒素诱导人脐静脉内皮细胞过氧亚硝基阴离子生成的影响

摘要

目的探讨异丙酚对内毒素诱导人脐静脉内皮细胞过氧亚硝基阴离子（ONOO-）生成的影响。方法培养至活细胞计数大于95%的人脐静脉内皮细胞,随机分为7组（n=5）,对照组（C组）不给予任何处理;LPS0.1组、LPS1组和LPS10组分别加入内毒素（LPS）至终浓度为0.1、1和10μg/ml,于37℃5%CO2培养箱中孵育6 h;P4+LPS10组和P40+LPS10组预先加入异丙酚至终浓度为4、40μg/ml,I40+LPS10组预先加入脂质溶剂Introlipid至终浓度为40μg/ml,于37℃5%CO2培养箱中孵育30 min,再分别加入LPS至终浓度为10μg/ml,于培养箱中继续孵育6 h。孵育6 h时,测定细胞活力和乳酸脱氢酶（LDH）释放率;采用免疫组化法和Western blot法测定硝基酪氨酸蛋白（NT）表达。结果与C组比较,其余各组细胞活力降低,内皮细胞NT表达上调,LPS1组、LPS10组、I40+LPS10组、P4+LPS10组和P40+LPS10组LDH释放率升高（P＜0.01）;与LPS0.1组比较,LPS1组细胞活力、LDH释放率和内皮细胞NT表达差异无统计学意义（P＞0.05）,LPS10组细胞活力降低,LDH释放率升高,内皮细胞NT表达上调（P＜0.01）;与LPS10组比较,I40+LPS10组细胞活力、LDH释放率和内皮细胞NT表达差异无统计学意义（P＞0.05）,P4+LPS10组和P40+LPS10组细胞活力升高,LDH释放率降低,内皮细胞NT表达下调（P＜0.01）。结论异丙酚可通过抑制ONOO-的生成,减轻内毒素诱导人脐静脉内皮细胞损伤。