异丙酚对大鼠肝BRL-3A细胞缝隙连接功能及顺铂诱导肝BRL-3A细胞毒性的影响

摘要

目的探讨异丙酚对大鼠肝BRL-3A细胞缝隙连接功能及顺铂诱导肝BRL-3A细胞毒性的影响。方法实验Ⅰ:将体外培养的大鼠肝BRL-3A细胞接种于12孔板内,采用随机数字表法,将其随机分为6组（n=8）:对照组（C组）、脂肪乳组（10μg/ml,I组）、油酸酰胺组（25μmol/L,O组）和不同浓度异丙酚组[P1组（1.5μg/ml）、P2组（2.8μg/ml）、P3组（4.1μg/ml）]。采用细胞接种荧光示踪法计算荧光示踪剂传递率和抑制率。实验Ⅱ:用不同密度接种方法获得大鼠肝BRL-3A细胞的高密度组（接种密度为1×10~5个/ml）和低密度组（接种密度为500个/ml）,采用随机数字表法,将两组各分为5个亚组（n=8）:空白对照亚组;顺铂亚组加入顺铂2.5μmol/L;顺铂+脂肪乳亚组加入顺铂2.5μmol/L及脂肪乳10μg/ml;顺铂+油酸酰胺亚组加入顺铂2.5μmol/L及油酸酰胺25μmol/L;顺铂+异丙酚亚组加入顺铂2.5μmol/L及异丙酚2.8μg/ml,其中油酸酰胺和异丙酚均于顺铂之前加入,单独的作用时间分别为1h和3h,与顺铂共同的作用时间为1h。采用标准细胞集落形成分析法评估异丙酚对顺铂的细胞毒性。结果与C组比较,O组、P1组、P2组和P3组荧光示踪剂传递率降低,抑制率升高（P＜0.05）;异丙酚呈浓度依赖性地降低荧光示踪剂传递率及升高抑制率（P＜0.05）。在高密度组中,异丙酚和油酸酰胺可升高细胞集落形成率（P＜0.05）,但在低密度组中,未见上述效应（P＞0.05）。结论异丙酚呈浓度依赖性地抑制大鼠肝BRL-3A细胞的缝隙连接功能;异丙酚可减弱顺铂诱导的大鼠肝BRL-3A细胞毒性,其机制可能与抑制细胞缝隙连接功能有关。