异氟醚后处理对大鼠缺氧缺糖-复氧复糖皮质神经元促凋亡蛋白表达的影响

摘要

目的评价异氟醚后处理对大鼠缺氧缺糖-复氧复糖皮质神经元促凋亡蛋白表达的影响。方法体外培养出生24 h内的SD大鼠原代皮质神经元,以1×10~6个/ml的密度接种于6孔板（2ml/孔）培养皿,采用随机数字表法分为3组（n=12）:对照组（C组）神经元正常培养;缺氧缺糖-复氧复糖组（OGD/R组）神经元缺氧缺糖30 min后复糖复氧;异氟醚后处理组（Ⅰ组）神经元缺氧缺糖30 min后复糖复氧即刻向培养皿中通入2%异氟醚,培养1 h。于培养24 h时收集神经元,采用Hoechst/PI双染色法测定神经元凋亡率;采用免疫印迹法测定caspas-3蛋白的表达;采用PCR法测定Bid、Bim和Puma的mRNA表达;采用Western blot法测定Bid、Bim和Puma的蛋白表达。结果与S组比较,OGD/R组神经元凋亡率升高,caspase-3蛋白、Bid、Bim和Puma的mRNA和蛋白表达上调（P＜0.05）;与OGD/R组比较,Ⅰ组神经元凋亡率下降,caspase-3蛋白、Bid、Bim和Puma的mRNA和蛋白表达下调（P＜0.05）。结论异氟醚后处理通过下调促凋亡蛋白表达,抑制大鼠缺氧缺糖-复氧复糖皮质神经元凋亡。