小鼠脑微血管内皮细胞的原代培养与纯化

摘要

目的:探讨纯度较高的小鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养.方法:取8～14周龄BALB/c或C57/BL6小鼠,无菌分离脑组织,采用改进的两种方法即2次酶消化和1次密度梯度离心法及1次酶消化和1次密度梯度离心法分离小鼠脑微血管段,接种于涂布有Ⅳ型胶原的培养皿上进行原代培养,相差显微镜下观察细胞形态,并以免疫荧光法鉴定Ⅷ因子相关抗原.结果:改进的两种方法均可见内皮细胞在接种后12～16h从微血管段周围爬出,5～7d时细胞呈"漩涡状"生长,并可见细胞汇合,90%以上培养的细胞Ⅷ因子相关抗原表达阳性.结论:改进后的两种方法均能进行较高纯度的小鼠脑微血管内皮细胞的分离和原代培养.