血清中可溶性白介素-2受体胶体金免疫层析试纸检测方法研究

摘要

快速、灵敏地检测血清中的可溶性白介素-2受体(sIL-2R)对相关疾病的临床诊断至关重要.本研究建立了一种基于胶体金免疫层析试纸条的快速、定量检测实际样品中sIL-2R的方法.在硝酸纤维膜上分别包被羊抗兔二抗(2ndAb)和兔抗鼠sIL-2R单克隆抗体(cAb)作为质控线(C线)和检测线(T线);以兔抗鼠sIL-2R单克隆抗体(dAb)修饰的金纳米粒子为标记物,采用双抗体夹心法制备用于sIL-2R检测的免疫层析试纸条.合成了3种不同形貌和粒径的金纳米粒子,考察了其对胶体金标记免疫层析试纸条检测性能的影响.实验结果表明,胶体金标记免疫层析试纸条对sIL-2R的检测性能与金纳米粒子的形貌和粒径密切相关;其中,金纳米棒(Gold nanorod,GNR)标记的免疫层析试纸条具有较宽的线性范围(1～6250 ng/mL)和较低的检出限(1.0 ng/mL).采用GNR免疫层析试纸条成功实现了荷三阴性乳腺肿瘤(MDA-MB-231)BALB/c裸鼠血清中sIL-2R浓度的检测,结果表明,sIL-2R浓度与肿瘤进程呈正相关.