单链脱氧核糖核酸探针在氧化锆陶瓷小珠表面的微阵列及陶瓷荧光小珠的制备

摘要

以N-(4-马来酰亚胺氧化丁酰)-琥珀酰亚胺磺酸钠盐(sulfo-GMBS)为偶联剂将5′- 氨基/3′- 得克萨斯红双末端修饰DNA探针偶联到3-(2-氨乙基氨丙基)三甲氧基硅烷(AATS)修饰的300 μm ZrO2陶瓷小珠表面, 制成荧光小珠.小珠表面上单链DNA探针分子之间的距离取决于小珠表面的预处理、偶联反应溶液中DNA探针浓度、小珠大小和小珠的数目. 在优化条件下, 20-mer 单链DNA 探针在小珠表面微阵列的最小分子间距约为7.6 nm, 即在一个300 μm ZrO2陶瓷小珠表面有1010数量级的20-mer单链DNA探针参与微阵列反应. 机理研究表明:DNA探针通过sulfo-GMBS偶联到小珠表面的化学反应仅涉及到探针末端修饰氨基.