中空纤维分离-高效液相色谱法测定静脉注射用人免疫球蛋白中的麦芽糖

摘要

建立了中空纤维分离-HPLC测定静脉注射用人免疫球蛋白中的麦芽糖含量的方法.在离心力的作用下,样品溶液中的小分子物质能透过垂直放置在离心管中的中空纤维,同时离心力也减小了膜外大分子形成的浓差极化.采用Inertsil NH2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)及示差折光检测器,流动相为V(乙腈)∶V(水)=70∶ 30,柱温40 ℃,流速为1.0 mL/min.麦芽糖浓度在1.00～5.00 g/L范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加标回收率为100.6%,RSD为1.4%.本方法简便快速、结果准确,克服了蛋白沉淀不完全,吸附严重等现象,为微量样品的分析提供了简单廉价超滤手段,适用于蛋白类制品小分子样品的前处理.