快速贴壁法分选表皮干细胞及其评价

摘要

目的:认识表皮干细胞对Ⅳ型胶原的黏附特性,评价重复利用Ⅳ型胶原以快速贴壁法在分选表皮干细胞中的作用.方法:未包被胶原培养瓶的细胞作为对照组Ⅰ,首次Ⅳ型胶原和三次Ⅳ型胶原包被的培养瓶分别作为实验组Ⅰ和实验组Ⅱ,将包被Ⅳ型胶原并曾黏附细胞的培养瓶消化后作为实验组Ⅲ.人角质形成细胞分别接种其上,15min后对贴壁细胞进行显微摄像并计数,数据用SAS软件分析.对贴壁细胞的生长及增殖活性进行观察,并用β1整合素、K19对贴壁的细胞进行鉴定.结果:与对照组相比,胶原包被组的贴壁细胞数明显增多(P≤0.05),并于5天铺满培养瓶底,而对照组12天后仍未铺满瓶底.各实验组细胞15min贴壁数无明显差异(P＞0.05).贴壁细胞β1整合素和K19表达阳性.结论:表皮干细胞对Ⅳ型胶原具有较好的黏附特性,利用快速贴壁法可以得到较高纯度的表皮干细胞,重复利用Ⅳ型胶原对表皮干细胞的黏附特性几乎无影响并可节约费用.