氯喹预处理在高糖环境下对HK-2细胞缺氧复氧损伤中的保护作用及机制

摘要

目的 探讨氯喹预处理在高糖环境下对人肾小管上皮细胞（HK-2）缺氧复氧损伤中的保护作用及机制。方法 随机将HK-2细胞分为3组（n=6）：高糖组（HG组）；高糖缺氧复氧组（HH/R组）；高糖缺氧复氧+氯喹预处理组（HH/R-CQ组）。采用高糖刺激72 h建立高糖模型,预处理组给予50 μmol氯喹与高糖同时作用72 h预处理,缺氧4 h复氧2 h建立缺氧复氧模型。采用细胞增殖与毒性（CCK-8）和乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测细胞活性,酶联免疫吸附试验法检测细胞内白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫荧光和Western blot法检测肾脏细胞TLR7、MyD88和NF-κB蛋白的表达。采用t检验进行统计学分析。结果 与HG组相比,HH/R组CCK-8活性下降,LDH、IL-6、TNF-α、细胞凋亡率、TLR7（0.635±0.034比0.857±0.052,t=4.77,P＆0.05）、MyD88（0.607±0.029比0.828±0.040,t=5.36,P＆0.05）及NF-κB（0.618±0.035比0.854±0.024,t=5.62,P＆0.05）表达增多；与HH/R组相比,HH/R-CQ组CCK-8活性上升,LDH、IL-6、TNF-α、细胞凋亡率、TLR7（0.857±0.052比0.642±0.024,t=4.61,P＆0.05）、MyD88（0.828±0.040比0.638±0.050,t=4.60,P＆0.05）及NF-κB（0.854±0.024比0.605±0.035,t=5.94,P＆0.05）表达减少。结论 氯喹通过抑制TLR7/MyD88信号通路,降低炎症反应,减少细胞凋亡从而减轻缺氧复氧损伤。