程序性坏死特异性抑制剂-1可抑制心搏骤停后大鼠脑细胞程序性坏死并改善脑损伤

摘要

目的探讨程序性坏死特异性抑制剂-1（Nec-1）对心搏骤停后大鼠脑损伤的影响及其机制。方法将24只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、模型组和Nec-1组, 每组8只。Sham组仅行一般手术操作, 不诱导心搏骤停;模型组采用窒息法诱导大鼠心搏骤停后6 min进行心肺复苏（CPR）;Nec-1组于大鼠心搏骤停后立即给予1 mg/kg的Nec-1干预, 心搏骤停后6 min进行CPR。各组大鼠于CPR后72 h进行神经功能缺损评分（NDS）;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清S100B水平;采用免疫荧光法观察脑皮质和海马受体相互作用蛋白3（RIP3）的表达, 并计算阳性率;采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测脑组织RIP3的蛋白表达水平。结果 CPR后72 h, 模型组大鼠出现明显的脑细胞程序性坏死和脑损伤, 表现为:与Sham组比较, NDS评分明显下降〔分:57.0（52.7, 60.0）比80.0（80.0, 80.0）, P＆0.05〕, 血清S100B水平明显升高（ng/L:44.9±4.5比18.6±1.5, P＆0.05）, 脑皮质和海马RIP3阳性率均明显增加〔脑皮质:（31.7±4.8）%比（11.6±3.2）%, 海马:（28.4±0.8）%比（10.9±0.6）%, 均P＆0.05〕, 脑组织RIP3蛋白表达水平明显升高〔RIP3蛋白（RIP3/GAPDH）:0.708（0.642, 0.722）比0.408（0.253, 0.504）, P＆0.05〕。而给予Nec-1干预后, 大鼠脑细胞程序性坏死和脑损伤均得到明显改善;与模型组比较, Nec-1组大鼠CPR后72 h NDS评分明显升高〔分:70.5（68.5, 71.7）比57.0（52.7, 60.0）, P＆0.05〕, 血清S100B水平明显下降（ng/L:31.9±2.7比44.9±4.5, P＆0.05）, 脑皮质和海马RIP3阳性率均明显降低〔脑皮质:（23.7±4.1）%比（31.7±4.8）%, 海马:（20.4±0.4）%比（28.4±0.8）%, 均P＆0.05〕, 脑组织RIP3蛋白表达水平明显下降〔RIP3蛋白（RIP3/GAPDH）:0.437（0.379, 0.507）比0.708（0.642, 0.722）, P＆0.05〕。结论 Nec-1可通过抑制RIP3蛋白表达改善脑细胞程序性坏死, 从而减轻心搏骤停后大鼠脑损伤。