博莱霉素致小鼠肺纤维化模型的动态演变及其发生机制

摘要

目的了解小鼠肺纤维化模型的动态演变,探讨博莱霉素致肺纤维化的作用机制。方法36只雄性ICR小鼠,按随机数字表法分为阴性对照组(NC组)和肺纤维化模型组(FMA、FMB、FMC、FMD、FME组),每组6只。除NC组外,其余各组经鼻滴入博莱霉素建立肺纤维化模型。分别于6、14、21、28和35d处死各组小鼠,取外周血经流式细胞仪测定T细胞亚群Th1/Th2和Tc1/Tc2,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中总细胞数和细胞分类,右肺行苏木素伊红(HE)及Masson染色,测定左肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量;并提取左肺组织总RNA,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)了解肺组织中多种细胞因子的表达。测定35d处死小鼠的潮气量(VT)、0.1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV0.1/FVC)和静态肺顺应性(Cst)。结果1肺纤维化各组小鼠BALF中细胞总数与NC组比较均显著增高(P均<0.01),且其肺组织中HYP含量除FMA组外均显著升高(P均<0.01)。2FME组VT和Cst均较NC组明显降低(P均<0.01),FEV0.1/FVC则显著升高(P<0.05)。3在肺纤维化模型炎症期(FMA组),T细胞Th1/Th2和Tc1/Tc2之间的平衡呈Th1、Tc1优势表达为主;在纤维化形成期(FMB、FMC组),则以Th2、Tc2优势表达;在肺纤维化形成后,Th1、Tc1再度呈优势表达的状态。4肺纤维化模型组中转化生长因子β1(TGFβ1)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)均较NC组显著升高(P均<0.01)。结论博莱霉素致肺纤维化小鼠肺功能为限制性通气功能障碍,Th2、Tc2及促纤维化生成因子在肺纤维化形成过程中发挥重要作用。