环氧化酶-2抑制剂对体外缺氧大鼠心肌细胞凋亡的影响

摘要

目的 观察体外培养心肌急性缺氧条件下环氧化酶-2（COX2）抑制剂与细胞凋亡间的关系.方法 分离、培养Wistar大鼠心肌细胞.以第4～6代心肌细胞24份样本（每份1×10^5个细胞）随机分为正常对照组、单纯缺氧组、缺氧＋COX-2抑制剂（NS-398,20 μmol/L）组及缺氧＋阿司匹林（100 μg/L）组.缺氧前30 min加入干预药物或等量二甲亚砜.以蛋白质免疫印迹法检测心肌细胞中COX-1/2表达;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;放射免疫法（RIA）检测心肌细胞培养液中6-酮-前列腺素F1α（6-ketoPGF1α）、血栓素B2（TXB2）含量.结果 各组心肌细胞中COX-1表达差异无显著性;COX2表达均较正常对照组增高,阿司匹林与NS-398均不抑制COX2表达.心肌细胞凋亡率由高到低依次为缺氧＋NS-398组、缺氧＋阿司匹林组、单纯缺氧组和正常对照组;缺氧＋NS-398组与其他各组间比较差异均有显著性（P均〈0.05）.各组心肌细胞培养液内TXB2水平由低到高依次为正常对照组、缺氧＋NS-398组、缺氧＋阿司匹林组和单纯缺氧组;缺氧＋NS-398组与单纯缺氧组比较差异有显著性（P〈0.05）;6-keto-PGF1α水平由低到高依次为正常对照组、缺氧＋NS-398组、缺氧＋阿司匹林组和单纯缺氧组;缺氧＋NS-398组与单纯缺氧组比较差异有显著性（P〈0.05）;TXB2/6-keto-PGF1α比值差异无显著性.结论 急性缺氧可直接诱导培养心肌细胞表达COX-2,而COX-1表达不增加,缺氧使培养液内COX-2作用产物TXB2、6keto-PGF1α水平升高,此效应无中性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞参与.COX-2抑制剂NS-398可降低缺氧心肌培养液内TXB2、6-keto-PGF1α升高程度,但不改变TXB2/6keto-PGF1α比值.急性缺氧可直接诱导心肌细胞凋亡,NS398可显著增加缺氧培养心肌凋亡率,此效应不需要其他组织细胞参与.