肝素对组蛋白诱导的肺组织血管性血友病因子和纤维蛋白原表达的影响

摘要

目的 观察组蛋白对小鼠肺组织损伤及血管性血友病因子（vWF）和纤维蛋白原（FIB）水平的影响,并探讨肝素的保护作用。方法 将24只6～10周龄雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、组蛋白组、组蛋白+肝素组,每组8只。组蛋白组经小鼠尾静脉注射组蛋白50 mg/kg；组蛋白+肝素组在给予组蛋白1 h后经尾静脉注射普通肝素400 U/kg；对照组均给予等量生理盐水。于组蛋白注射4 h后取小鼠双肺,测量肺湿/干重比值（W/D）、肺组织含水量；苏木素-伊红（HE）染色后,光镜下观察肺组织病理学改变,并进行肺组织病理学评分；采用免疫组化法观察肺组织内皮细胞损伤标志物vWF阳性表达；采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定肺组织FIB mRNA表达水平。结果 组蛋白组小鼠肺W/D比值和肺组织含水量均明显高于对照组〔肺W/D比值：6.19±0.53比4.54±0.25,肺组织含水量：（82.59±2.03）%比（78.52±1.51）%,均P＆0.01〕；而组蛋白+肝素组肺W/D比值和肺组织含水量均较组蛋白组明显降低〔肺W/D比值：4.84±0.35比6.19±0.53,肺组织含水量：（79.21±1.48）%比（82.59±2.03）%,均P＆0.01〕,说明肝素可减轻组蛋白诱导的肺水肿。光镜下显示,对照组肺泡结构完整,肺泡腔干净无渗出；组蛋白组肺泡间隔增厚,炎性细胞浸润,肺泡出血、水肿,肺泡腔内纤维蛋白沉积,微血栓形成,且肺组织病理学评分显著高于对照组（分：5.15±0.87比0.18±0.17,P＆0.01）；组蛋白+肝素组上述病理学改变均明显减轻,且肺组织病理学评分较组蛋白组明显降低（分：2.28±0.72比5.15±0.87,P＆0.01）,说明肝素可减轻组蛋白诱导的肺组织病理学改变。免疫组化显示,对照组肺组织几乎无vWF阳性表达；组蛋白组呈vWF高表达；而组蛋白+肝素组vWF阳性表达明显减少,说明给予肝素处理后可减轻组蛋白诱导的肺组织内皮细胞损伤。RT-PCR显示,组蛋白组肺组织FIB mRNA表达量约为对照组的49.82倍（2-ΔΔCT：55.30±18.84比1.11±0.45,P＆0.01）；组蛋白+肝素组FIB mRNA表达量约为对照组的23.87倍（2-ΔΔCT：26.50±9.97比1.11±0.45,P＆0.01）,但较组蛋白组明显降低（2-ΔΔCT：26.50±9.97比55.30±18.84,P＆0.01）,说明肝素可抑制组蛋白诱导的肺组织高凝状态。结论 组蛋白可导致肺水肿、肺组织内皮细胞损伤及凝血活化；肝素能有效减轻组蛋白诱导的肺损伤和凝血活化。