miR-155对乳腺癌细胞增殖、凋亡及耐药蛋白表达的调控作用研究

摘要

目的：探讨 microRNA⁃155（miR⁃155）对乳腺癌 MCF⁃7细胞增殖、凋亡及乳腺癌耐药相关蛋白表达的调控作用。方法采用实时荧光定量 PCR（qRT⁃PCR）法检测 MCF⁃7细胞和人乳腺正常上皮细胞中 miR⁃155的表达水平。将 MCF⁃7细胞分为4组：对照组、空转染组、抑制（转染 miR⁃155 inhibitor）组和过表达（转染 miR⁃155 mimics）组，采用 qRT⁃PCR 检测转染24、48、72及96 h 后各组的转染效果，噻唑蓝（MTT）法检测各组转染24、48、72及96 h 的增殖能力，采用流式细胞仪 PI／ An⁃nexin V 双染色法检测各组转染24、48 h 后的凋亡率，Western blotting 法检测各组转染48 h 后乳腺癌耐药蛋白（BCRP）、P⁃糖蛋白（P⁃gp）及多药耐药相关蛋白1（MRP1）的表达水平。结果乳腺癌 MCF⁃7细胞中的 miR⁃155水平高于人乳腺正常上皮细胞（P＜005），且转染 miR⁃155 inhibitor 或 mimics 可呈时间依赖的方式降低或升高 MCF⁃7细胞的 miR⁃155水平（P＜005）。与对照组相比，抑制组转染后的细胞增殖率及 BCRP、P⁃gp 和 MRP1的表达水平均降低，凋亡率升高（P＜005）；而过表达组的细胞增殖率及 BCRP、P⁃gp 和 MRP1的表达水平均升高，凋亡率降低（P＜005）。结论 MCF⁃7细胞中 miR⁃155呈高表达，下调miR⁃155表达可抑制其增殖及耐药相关蛋白的表达，同时诱导凋亡。