microRNA-155

摘要： 目的探讨microRNA-155(miR-155)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)和甲胎蛋白(AFP)在肝细胞肝癌(HCC)患者预后中的评估价值。方法选择2015年6月—2018年6月本院收治的186例HCC患者作为研究对象,按照3年随访的结果,分为预后良好组(80例)和预后不良组(106例)两组。比较miR-155、TSGF和AFP在两组间的表达差异,分析其在HCC患者预后评估中的价值,并探讨影响患者预后不良的独立危险因素。结果预后不良组患者miR-155、TSGF和AFP水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),三者联合预测HCC患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.886,灵敏度和特异度可达到85.3%、78.1%。miR-155、TSGF和AFP在肿瘤直径≥5 cm、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期、分化程度为低分化、门静脉侵犯、淋巴结转移、肝外转移的患者中明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logisitic回归分析显示,TNM分期、分化程度、门静脉侵犯、淋巴结转移、肝外转移以及高水平的miR-155、TSGF和AFP是HCC患者预后不良的独立危险因素,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-155、TSGF和AFP在预后不良HCC患者中明显升高,是影响患者预后不良的独立危险因素,联合检测有助于HCC患者预后评估。

摘要： 目的:观察GLP-1受体激动剂(利拉鲁肽)对糖尿病大鼠microRNA-155(miR-155)及Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:取8周龄雄性SD大鼠40只,适应性喂养1周后随机分为对照组(n=10)和高脂饮食组(n=30),6周后,高脂饮食组大鼠给予STZ诱导2型糖尿病动脉粥样硬化模型,对照组给予等量柠檬酸缓冲液。模型大鼠随机分为糖尿病组、利拉鲁肽中剂量组[200μg/(kg·d)]和利拉鲁肽大剂量组[400μg/(kg·d)],各组10只,干预8周。取血用于测定空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);RT-PCR法检测各组大鼠主动脉粥样硬化病变部位miR-155、TLR4和核因子-κB(NF-κB)mRNA的水平。结果:与对照组相比,糖尿病组大鼠FBG、TC、TG、LDL-C水平均升高(P<0.01),体重下降(P<0.01);miR-155、TLR4和NF-κB mRNA水平升高(P<0.01)。与糖尿病组相比,利拉鲁肽中、大剂量组血糖、血脂均显著减低(P<0.05);miR-155和TLR4、NF-κB mRNA水平明显下降(P<0.05和P<0.01),其中在利拉鲁肽大剂量组对三者的下调作用更显著。结论:GLP-1受体激动剂不仅显著降低血糖,调节血脂,还能下调动脉粥样硬化病变部位miR-155水平,呈剂量依赖性抑制TLR4/NF-κB炎症因子表达,发挥血管保护作用。

摘要： Ⅱ型固有免疫细胞(ILC2)受刺激后可产生Th2型细胞因子,促进变应性鼻炎(AR)迟发相反应。miR-155在免疫系统的发育、免疫细胞的成熟分化以及维持免疫功能中都发挥至关重要的作用。GATA结合蛋白3(GATA3)是能够促进ILC2发育成熟的转录因子,而在肿瘤研究中,GATA3是miR-155的靶基因。该文对参与AR鼻黏膜中的ILC2转录因子GATA3及可干扰其表达的miR-155作一综述。

摘要： 结核病是人类面对的主要慢性传染病之一,在诊断和治疗方面仍充满挑战。微小RNA (microRNA, miRNA)是一类在转录后水平调节基因表达的非编码RNA分子。大量研究表明,miR-155作为一个多功能miRNA,和结核病发生发展密切相关,在结核感染后的凋亡、自噬、细胞极化等活动中发挥免疫调节作用。有可能成为新的诊断标记物和治疗靶点。

摘要： 目的 探讨microRNA-155(miR-155)在心脏衰竭患者中的表达及临床意义。方法 选择2019年1月至2020年12月在心血管内科住院的心脏衰竭患者40例作为心衰组,选取同期健康志愿者40例作为对照组。实时荧光定量PCR法对两组患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-155相对表达量进行检测;分别测定两组患者血清肌酐(Cr)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、脑钠肽(BNP)水平;分别测定两组患者的左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDd)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)。比较两组患者的miR-155、生化指标、心功能指标差异,采用Pearson线性相关分析miR-155相对表达量与生化指标、心功能指标相关性。结果 心衰组患者血清miR-155相对表达量、Cr水平、hs-CRP水平、BNP水平及LVEDd均显著高于对照组(P均0.05);Pearson相关性分析显示,miR-155与Cr、hs-CRP、BNP呈显著正相关(r=0.221,0.685,0.746,P均0.05)。结论 血清miR-155在心脏衰竭患者体内呈明显高表达,其相对表达量变化与患者心功能及部分生化指标密切相关,可考虑其作为诊断心脏衰竭的循环标志物。

摘要： 目的探讨MicroRNA-155靶向细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)1基因对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)内皮细胞炎症损伤的作用。方法构建动脉粥样硬化(AS)大鼠模型,分离、培养、鉴定大鼠原代冠状动脉内皮细胞,使用同型半胱氨酸与细胞共孵育24 h,进行冠心病应激,将细胞分组。双荧光素酶报告基因实验验证MicroRNA-155和SOCS1的靶向关系。实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹检测心肌组织和各组细胞中MicroRNA-155和SOCS1表达水平。四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞活力。使用Hochest33258染色检验细胞凋亡率。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10和IL-18表达。结果与正常组相比,AS组血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、Ca~(2+)水平均明显提高(P<0.05);AS组心肌组织中MicroRNA-155水平显著升高,SOCS1 mRNA及蛋白水平显著下降(P<0.05);SOCS1证实为MicroRNA-155的靶基因。与空白对照组相比,MicroRNA-155mimics组SOCS1蛋白水平下降,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,IL-1β、IL-6和IL-18表达水平上升,IL-10表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05);而MicroRNA-155 inhibitor组的SOCS1 mRNA及蛋白水平上调,细胞活力增加,细胞凋亡率下降,IL-1β、IL-6和IL-18表达水平下降,IL-10表达水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论MicroRNA-155通过靶向抑制SOCS1基因,进而增加冠心病大鼠心肌微血管内皮细胞凋亡率及增加促炎症因子的表达,从而发挥对心肌微血管内皮细胞的促炎作用。

摘要： 目的 探讨MicroRNA-155在原发性免疫性血小板减少症(ITP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其临床意义.方法 选取十堰市妇幼保健院2015年2月至2019年6月收治的83例原发性ITP患儿纳入病例组,另选取同期于我院接受体检的健康儿童80例纳入健康组.比较两组受检者PBMC中的MicroRNA-155相对表达量及血小板计数(PLT)、细胞因子[干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)]和T细胞亚群水平,采用Pearson相关性分析MicroRNA-155相对表达量与PLT、细胞因子及T细胞亚群水平的相关性.结果 病例组患儿PBMC中MicroRNA-155相对表达量、Th1及血清IFN-γ、IL-2水平分别为4.31±1.04、(26.34±2.11)％、(151.23±5.02)pg/mL、(72.05±1.39)pg/mL,明显高于健康组的1.56±0.31、(11.52±2.20)％、(94.57±3.29)pg/mL、(42.37±1.28)pg/mL;而PLT、Treg、Th2及血清IL-4、IL-10水平分别为(45.62±18.55)×109/L、(3.60±0.75)％、(1.26±0.51)％、(24.92±1.05)pg/mL、(141.28±1.67)pg/mL,明显低于健康组的(198.73±25.21)×109/L、(3.98±0.37)％、(1.72±0.24)％、(42.37±1.72)pg/mL、(196.03±0.25)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析结果显示:PBMC中MicroRNA-155相对表达量与PLT(r=-0.683)、IL-4(r=-0.611)、IL-10(r=-0.520)、Treg(r=-0.522)、Th2(r=-0.572)水平均呈负相关(P<0.05),而与IFN-γ(r=0.634)、IL-2(r=0.545)、Th1(r=0.821)水平均呈正相关(P<0.05).结论 MicroRNA-155在ITP患儿PBMC中存在明显高表达,且与PLT、IL-4、IL-10、Treg及IFN-γ、IL-2、Th1、Th2水平均存在一定相关性,具有作为ITP患儿治疗靶点的潜力.

摘要： cqvip:慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)是一类病情的综合,具体表现为排尿出现困难和慢性盆腔疼痛,部分病例出现性功能障碍及相关神经精神症状。该疾病现已经成为50岁以下青年男性就诊于泌尿外科门诊的主要病因,然而,疾病发生原因以及进展的内在机制至今不清。据观察,CP动物模型中可见大量白细胞分化抗原4(cluster of differentiation 4,CD4)阳性T细胞浸润,临床标本中也检测出相关炎症因子[1]。细小RNA(MicroRNA,miRNA)是一类能够控制包括细胞增殖、分化及凋亡在内的一系列生物学进程的多功能的非编码核糖核苷酸。

摘要： 目的 探讨重组人血管内皮抑制素、顺铂和氟尿嘧啶联合治疗对宫颈癌患者血清肿瘤标志物及microRNA-24(miR-24)和microRNA-155(miR-155)水平的影响.方法 选择2017年1月至2019年1月邯郸市第一医院收治的106例宫颈癌患者为研究对象,按照治疗方法分为观察组和对照组,每组53例.2组患者均给予放射治疗和顺铂、氟尿嘧啶化学治疗,在此基础上,观察组患者给予重组人血管内皮抑制素治疗.对2组患者治疗前后血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、癌胚抗原相关细胞黏附分子6(CEACAM6)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、糖链抗原15-3(CA15-3)、糖链抗原19-9(CA19-9)、糖链抗原125(CA125)、miR-24、miR-155水平进行比较,治疗期间观察患者不良反应发生情况,治疗后评估患者临床疗效.结果 治疗前2组患者血清SCCA、CA15-3、CA19-9、CA125、MMP-9、VEGF、CEACAM6水平比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者治疗后血清SCCA、CA15-3、CA19-9、CA125、MMP-9、VEGF、CEACAM6水平显著低于治疗前(P0.05);与治疗前比较,治疗后2组患者血清中miR-24相对表达量升高,血清中miR-155相对表达量降低(P0.05).2组患者呕吐恶心、血小板减少、肝功能损伤、肾功能损伤及骨髓抑制发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 顺铂、氟尿嘧啶和重组人血管内皮抑制素联合治疗可有效降低宫颈癌患者血清肿瘤标志物水平,抑制肿瘤生长,提高治疗效果,其机制可能与重组人血管内皮抑制素调节血清MMP-9、VEGF、CEACAM6、miR-24和miR-155水平有关.

摘要： 目的 研究T细胞免疫应答调控因子miR-155在HIV-1感染者T细胞中的表达及其与T细胞免疫激活和耗竭的关系.方法 收集71例抗病毒治疗有效和76例治疗无效的HIV-1感染者,分选CD4+和CD8+T细胞,提取RNA后定量PCR检测miR-155水平,流式细胞术检测T细胞激活和耗竭比例.结果 两组HIV-1感染者T细胞miR-155水平、激活和耗竭比例均较健康对照显著升高(P<0.01),且治疗无效组的变化更为明显,显著高于治疗有效组(P<0.05).相关性分析显示,HIV-1感染者T细胞miR-155与免疫激活和耗竭呈正相关(P<0.01).结论 HIV-1感染者T细胞高表达miR-155,并与T细胞激活和耗竭正相关,可作为一种评估HIV-1感染者T细胞功能的生物学指标.

摘要： 本发明提供一种MicroRNA捕获磁珠、制备方法及MicroRNA的检测方法，属于生物技术领域。该方法将链霉亲和素生物磁珠和生物素修饰的与待测hsa‑miRNA‑146b‑5p完全互补的ssDNA探针混合，得到MicroRNA捕获磁珠；将荧光基团FAM修饰的与ssDNA探针部分互补的荧光DNA和MicroRNA捕获磁珠混合杂交，制备得到荧光MicroRNA捕获磁珠；将含有hsa‑miRNA‑146b‑5p的待测液与荧光MicroRNA捕获磁珠混合，进行链置换反应，得到置换后的MicroRNA捕获磁珠。该方法操作简便，成本低。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及一种循环microRNAs检测试剂盒和特异性检测循环microRNAs的方法及应用。该试剂盒包括：具有粘性末端的发卡结构DNA，其一部分与目标microRNA的至少一部分互补配对；双链特异性核酸酶及反应缓冲液；环状DNA探针，其一部分与发卡结构DNA的一部分互补配对；任选的以下组份之一：SYBR Gold荧光核酸染料；DNA聚合酶；DNA聚合酶反应缓冲液；4×dNTPs。本发明采用双链特异性核酸酶介导的靶标循环反应和滚环扩增反应对循环miRNAs进行特异性检测，既可以降低检测背景又可以起到双向信号放大的作用，具有操作简单、检测快速，灵敏度高、特异性好和成本低等特点。

摘要： 本发明涉及分子检测技术领域，尤其涉及microRNA检测探针组与microRNA的检测方法。本发明提供了用于microRNA检测探针组与microRNA的检测方法，该探针组设计合理，利用链替换反应使得荧光信号得到级联放大，从而实现了对细胞内miRNA的检测。该方法无需严格的操作条件，操作简单，特别是在miRNA分子低表达的细胞或者组织中具有非常好的优势。解决了在之前的检测技术中存在检测体系中信号分子输出中伴随着目标链损失的巨大困难。实验表明，采用本发明提供的探针对miRNA进行检测，能够使荧光信号在1h左右达到最高，且最大程度避免了荧光信号泄露现象的产生。

摘要： 本发明涉及医学生物检测技术领域，本发明提供了MicroRNA‑4454和MicroRNA‑7975在制备检测银屑病试剂或试剂盒中的应用。本发明通过前期应用Real‑Time PCR Array技术发现了在银屑病患者指甲中MicroRNA‑4454和MicroRNA‑7975水平存在显著下调，进而提供了从人类指甲提取RNA技术方法和试剂盒及利用该试剂盒提取指甲microRNA进行Real‑Time PCR检测，能够准确发现银屑病患者指甲中MicroRNA‑4454和MicroRNA‑7975水平的下调。本发明的试剂盒及方法可早期预测银屑病的发生和进行早期诊断，对于银屑病的防治具有重要意义。本发明是一种早期预测难治性皮肤疾病‑‑银屑病提供了新的临床检测方法。

摘要： 本发明公开了人工合成的microRNA簇及其构建方法与所用合成microRNA单元。该microRNA簇，是由X个合成miRNA单元串联而成的RNA分子，所述合成miRNA单元是人工合成的pri‑miRNA，X为4‑18的一个自然数，所述X个合成miRNA单元特异靶向1个或1个以上且不超过X个的位点；每个所述合成miRNA单元是SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的四种RNA中的任一种RNA；SEQ ID No.1‑4中，第29‑49位是靶向靶基因mRNA的miRNA的反义序列，第69‑87位是该miRNA的正义序列。该microRNA簇没有明显的位置效应并具有低的脱靶效应。

摘要： 本发明提供一种MicroRNA捕获磁珠、制备方法及MicroRNA的检测方法，属于生物技术领域。该方法将链霉亲和素生物磁珠和生物素修饰的与待测hsa‑miRNA‑146b‑5p完全互补的ssDNA探针混合，得到MicroRNA捕获磁珠；将荧光基团FAM修饰的与ssDNA探针部分互补的荧光DNA和MicroRNA捕获磁珠混合杂交，制备得到荧光MicroRNA捕获磁珠；将含有hsa‑miRNA‑146b‑5p的待测液与荧光MicroRNA捕获磁珠混合，进行链置换反应，得到置换后的MicroRNA捕获磁珠。该方法操作简便，成本低。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及一种循环microRNAs检测试剂盒和特异性检测循环microRNAs的方法及应用。该试剂盒包括：具有粘性末端的发卡结构DNA，其一部分与目标microRNA的至少一部分互补配对；双链特异性核酸酶及反应缓冲液；环状DNA探针，其一部分与发卡结构DNA的一部分互补配对；任选的以下组份之一：SYBR Gold荧光核酸染料；DNA聚合酶；DNA聚合酶反应缓冲液；4×dNTPs。本发明采用双链特异性核酸酶介导的靶标循环反应和滚环扩增反应对循环miRNAs进行特异性检测，既可以降低检测背景又可以起到双向信号放大的作用，具有操作简单、检测快速，灵敏度高、特异性好和成本低等特点。

摘要： 本发明涉及一种microRNA检测试剂盒和多生物素分子检测microRNA的方法。本发明将待测microRNA分子与放大桥分子、捕获桥分子一起加入到固相上进行杂交，通过捕获桥分子分别与microRNA分子和捕获分子的部分杂交，将microRNA分子捕获到固相上，而放大桥分子的一端与靶分子杂交识别，另一端与下一步加入的放大分子结合，放大分子上连接的多个生物素分子再与标记物如辣根过氧化物酶结合，最终实现microRNA分子的检测过程。本发明方法十分灵敏，而且是通过信号放大而不是基于PCR的模板扩增技术来实现对核酸的检测，从而避免PCR固有的污染问题。

摘要： 本发明公开了人工合成的microRNA簇及其构建方法与所用合成microRNA单元。该microRNA簇，是由X个合成miRNA单元串联而成的RNA分子，所述合成miRNA单元是人工合成的pri-miRNA，X为4-18的一个自然数，所述X个合成miRNA单元特异靶向1个或1个以上且不超过X个的位点；每个所述合成miRNA单元是SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的四种RNA中的任一种RNA；SEQ ID No.1-4中，第29-49位是靶向靶基因mRNA的miRNA的反义序列，第69-87位是该miRNA的正义序列。该microRNA簇没有明显的位置效应并具有低的脱靶效应。

摘要： 本发明涉及分子检测技术领域，尤其涉及microRNA检测探针组与microRNA的检测方法。本发明提供了用于microRNA检测探针组与microRNA的检测方法，该探针组设计合理，利用链替换反应使得荧光信号得到级联放大，从而实现了对细胞内miRNA的检测。该方法无需严格的操作条件，操作简单，特别是在miRNA分子低表达的细胞或者组织中具有非常好的优势。解决了在之前的检测技术中存在检测体系中信号分子输出中伴随着目标链损失的巨大困难。实验表明，采用本发明提供的探针对miRNA进行检测，能够使荧光信号在1h左右达到最高，且最大程度避免了荧光信号泄露现象的产生。