濒危植物七子花RAPD条件的优化

摘要

以改进SDS法抽提濒危植物七子花嫩叶总DNA,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,分别测试了镁离子, dNTP,模板DNA含量,引物和DNA聚合酶量对反应结果的影响,通过各因子的组合研究,可知七子花RAPD分析较适宜的扩增条件是:15 μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris*HCl pH 9.0, 50 mmol/L KCl, 0.1% Triton X-100),2.5 mmol/L MgCl2,2U Taq酶(上海华美公司),10 ng模板DNA,20 pmol引物(上海Sangon公司);dATP、dCTP 、dGTP 、dTTP 各0.1 mmol/L.