应用骨髓基质干细胞体外构建组织工程化管状软骨的实验研究

摘要

目的以骨髓基质干细胞（bone marrow stroma cells，BMSCs）为种子细胞，接种于管状聚羟基乙酸（PGA）支架上，在体外构建组织工程化管状软骨。方法取长枫杂交仔猪髂骨骨髓，在低糖DMEM完全培养液培养2周，传代后以浓度为5×107／ml细胞悬液均匀接种于管状PGA支架上，以高糖DMEM低血清特定培养液诱导（含胰岛素2mg／L、转铁蛋白3mg／L、丙酮酸100mg／L、地塞米松10-7mol／L、TGF-β10ng／L、葡萄糖4．5mg／ml、2％胎牛血清），连续诱导培养10周，从大体、组织学和Ⅱ型胶原免疫组化对再生组织进行评价。结果6周时染色见BMSCs—PGA复合物表层为2～4层成纤维样细胞组成的软骨膜，下层为较成熟的软骨组织，软骨细胞包埋在软骨陷窝内，有很多散在PGA纤维，而在中间部分，组织量较少，结构较构散。10周时BMSCS-PGA复合物外观呈乳白色软骨样，管壁较厚，有一定的弹性，但中间部管腔塌陷较明显，苏木素-伊红染色见实验组管状BMSCs—PGA和6周时相似，