人结肠癌细胞中组蛋白乙酰化对细胞周期调节基因表达的影响

摘要

目的研究组蛋白乙酰化对Colo-320和SW1116人结肠癌细胞系p21WAF1和p16INKRA基因表达的影响。方法培养人结肠癌细胞系SW1116和Colo-320，分别以去甲基化制剂5-氮脱氧胞苷（5-aza-dC）和/或组蛋白脱乙酰化酶（HDAC）抑制剂曲古抑菌素（TSA）及丁酸钠（NaBu）干预细胞。运用流式细胞术检测细胞周期变化；以定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法研究控制细胞周期的基因p21WAF1和p16INKRA的表达；染色质免疫沉淀技术分析基因相关染色质乙酰化组蛋白的水平。结果TSA或NaBu使人结肠癌细胞阻滞于G1期，而5-aza-dC并不能改变细胞周期。正常情况下，SW1116和Colo-320细胞中均有较弱的p16INKRA表达；两种结肠癌细胞系p21WAF1表达缺如。5-aza-dC干预后，p16INKRA表达增强，相反p21WAF1仍无明显表达。当该两个细胞系经TSA或NaBu处理后，p21WAF1转录水平明显上调，并诱导p21WAF1基因相关染色质乙酰化组蛋白H3和H4的积聚。结论两种人结肠癌细胞系上，HDAC抑制剂通过选择性增加p21WAF1基因相关染色质乙酰化水平，上调p21WAF1基因的转录，并相应地导致结肠癌细胞生长停滞；而p16INKRA基因表达主要受甲基化调节。