神经干细胞体外三维培养模型的构建

摘要

研究了小鼠海马NSCs在胶原凝胶内的生长情况,构建适合于干细胞药物筛选及作用机理研究的三维培养模型。实验采用体外培养第三代NSCs,均匀混合于胶原溶液中,形成"细胞-胶原"的三维凝胶培养。通过扫描电镜观察胶原的微观结构,倒置显微镜及激光共聚焦显微镜观察胶原凝胶中NSCs的生长、伸展情况;应用免疫荧光技术鉴定NSCs,同时采用CCK-8法检测不同胶原浓度及不同培养模式下NSCs的生存和增殖能力。结果表明:质量浓度为0.5 mg/mL的胶原具有良好的三维多孔结构,凝胶中的NSCs生长状态良好,且大部分呈Nestin、BrdU阳性;与传统二维培养方式相比,三维胶原凝胶更利于NSCs的生存及增殖。