T-80对木瓜蛋白酶酶活和构象的影响

摘要

为探究非离子型表面活性剂与木瓜蛋白酶的作用机理,本文以聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯（T-80）为作用主体,采用紫外、荧光和远紫外圆二色等光谱技术研究木瓜蛋白酶-T-80体系在不同pH和不同T-80质量浓度下木瓜蛋白酶的酶活及其构象变化。结果表明：在所考察的pH（6.30、8.00、9.50）条件下,T-80对木瓜蛋白酶酶活有抑制作用,而且pH越高,T-80质量浓度越大,对酶活的抑制作用越强。当T-80质量浓度小于或等于1 bcmc（bcmc为T-80的临界胶束浓度）时,T-80对木瓜蛋白酶的荧光有增强作用,质量浓度越大,增强作用越明显;而当T-80质量浓度大于1bcmc后,T-80对木瓜蛋白酶的荧光则有猝灭作用,质量浓度越大,猝灭作用越强。当T-80质量浓度小于15mg/L时,木瓜蛋白酶的α-螺旋、无规卷曲构型百分数减少,β-折叠、回转构型百分数增加;当T-80质量浓度高于15mg/L后,木瓜蛋白酶的α-螺旋、无规卷曲构型百分数增加,而β-折叠、回转构型百分数减少。木瓜蛋白酶的无规卷曲构型百分数越大,酶活越低,这是T-80对木瓜蛋白酶酶活产生抑制作用的主要原因之一。