ERK信号转导途径在小檗碱抑制脂多糖诱导的COX-2表达中的作用

摘要

目的 探讨小檗碱是否抑制脂多糖诱导的COX-2 mRNA及蛋白表达,以及小檗碱是否通过ERK信号转导途径抑制COX-2的表达.方法 取健康志愿者外周血,分离及培养单核细胞,分为五组,分别为对照组;脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)组;LPS+小檗碱25 μmol/L组;LPS+小檗碱50 μmol/L组;LPS+小檗碱100 μmol/L组.分别在培养后30 min,6 h,12 h,24 h提取细胞,行RT-PCR法测定COX-2 mRNA水平,行westernblot法测定ERK、p-ERK及COX-2蛋白水平.同时加入选择性ERK抑制剂,分别测定COX-2 mRNA及蛋白水平.结果 与对照组相比,LPS组COX-2 mRNA及蛋白表达明显增强(P<0.01).与LPS组相比,小檗碱组COX-2 mRNA及蛋白表达明显抑制(P<0.05),且随着浓度增加,抑制作用更明显,在给药后12 h,小檗碱对COX-2抑制作用最强.与LPS组相比,小檗碱组ERK活性水平有明显统计学差异(P<0.05).加入ERK抑制剂之后,COX-2 mRNA及蛋白水平降低明显(P<0.05).结论小檗碱能抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白水平,其作用程度呈浓度依赖性,小檗碱对ERK活性蛋白表达有明显抑制作用.小檗碱可能通过ERK信号转导途径抑制人外周血单核细胞COX-2 mRNA及蛋白表达.