基于HMGB1-RAGE信号通路研究奥拉米特预防抗结核药物性肝损伤的作用机制

摘要

目的:初步探讨奥拉米特预防抗结核药物性肝损伤(ATB-DILI)的可能机制.方法:将60只昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组[甘草酸二铵60 mg/(kg·d)]和奥拉米特低、中、高剂量组[80、160、320 mg/(kg·d)],每组10只.除空白组外,其余各组小鼠均灌胃异烟肼[75 mg/(kg·d)]+利福平[75 mg/(kg·d)]14 d以复制ATB-DILI模型.与此同时,各给药组小鼠灌胃相应药液,空白组和模型组小鼠灌胃生理盐水,给药体积均为20 mL/(kg·d),每天给药1次,连续给药14 d.每天观察并记录小鼠生长发育、精神状态、饮食等一般情况.末次给药后,计算其肝指数,以苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肝组织病理学改变,采用链霉抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫组化法检测其肝组织中高速泳动族蛋白B1(HMGB1)、核因子κB(NF-κB)的阳性表达情况,采用酶联免疫吸附法检测其血清中肝功能指标水平和肝组织中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况.结果:与空白组比较,模型组小鼠生长发育迟缓,食欲、精神等差,肝指数和血清中总胆红素、直接胆红素、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、γ-谷氨酰转肽酶水平均显著升高(P<0.05);肝小叶结构紊乱,肝细胞变性、坏死,并伴炎症细胞浸润;肝组织中HMGB1、NF-κB、RAGE、TNF-α的表达均显著增强(P<0.05).与模型组比较,奥拉米特低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠的一般情况均有不同程度好转,肝指数和上述血清指标均显著降低(P<0.05),肝组织病理学变化均有不同程度改善,肝组织中HMGB1、NF-κB、RAGE、TNF-α的表达均显著降低(P<0.05),且奥拉米特高剂量组上述指标改善效果均显著优于奥拉米特低、中剂量组(P<0.05),ALP、TBA水平显著低于阳性对照组(P<0.05).结论:奥拉米特能够预防异烟肼联合利福平所致的小鼠ATB-DILI,其机制可能与下调肝组织HMGB1和RAGE蛋白表达、抑制炎症因子分泌有关.