UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中5-FU及其代谢产物5-FUH2的浓度及应用

摘要

目的:建立同时测定人血浆中5-氟尿嘧啶(5-FU)及其代谢产物5-氟-5,6-二氢尿嘧啶(5-FUH2)浓度的方法,并应用于临床.方法:血浆样品经乙酸乙酯二次萃取处理后,以5-溴尿嘧啶(5-Bru)为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱技术(UPLC-MS/MS)测定.色谱柱为Acquity UPLC HSS T3,流动相为甲醇-水(30:70,V/V),流速为0.3 mL/min,柱温为20°C,进样量为5μL.采用电喷雾离子源,以多反应监测进行负离子扫描,毛细管电压为1.5 kV,锥孔电压为20 V,脱溶剂温度为450°C,脱溶剂气流为850 L/h,锥孔气流速为50 L/h;用于定量分析的离子对分别为m/z 129.00→41.90(5-FU)、m/z 130.87→82.92(5-FUH2)、m/z 189.00→42.10(5-Bru).选择2020年8-10月哈尔滨医科大学附属肿瘤医院接受5-FU持续静脉滴注46 h为基础化疗方案治疗的晚期结直肠癌患者10例,测定其持续静脉滴注18～30 h时的5-FU稳态血药浓度及5-FUH2血药浓度,计算5-FU药-时曲线下面积(AUC)和5-FUH2/5-FU浓度比值.结果:5-FU、5-FUH2检测质量浓度的线性范围均为20～1000 ng/mL(R 2均大于0.990),定量下限均为20 ng/mL;精密度试验的RSD均小于20％,相对误差在±10％范围内;提取回收率、基质效应均不影响待测物的测定.10例晚期结直肠癌患者中,5-FU稳态血药浓度为180.04～622.83 ng/mL,AUC为8.28～28.65 mg·h/L;5-FUH2血药浓度为336.48～948.43 ng/mL;5-FUH2/5-FU浓度比值为0.93～4.21;10例患者的5-FU AUC存在约3～4倍的个体差异.结论:所建方法精密度、准确性均较好,灵敏度较高且操作简便,可用于晚期结直肠癌患者体内5-FU血药浓度的监测.