共载阿霉素与小干扰RNA的脂质介孔硅纳米粒的制备表征及抗多药耐药肿瘤细胞研究

摘要

目的 制备共载阿霉素(DOX)与小干扰RNA(siRNA)的脂质介孔硅纳米粒(CLMSNs-SS-NH_2@DOX/siRNA),并对其进行表征及抗多药耐药肿瘤细胞研究。方法 先以介孔硅纳米粒(MSNs)为基础制备MSNs-SS-NH_2@DOX,并以阳离子脂质体(CLs)对其包覆制得CLMSNs-SS-NH_2@DOX,进一步负载siRNA即得CLMSNs-SS-NH_2@DOX/siRNA。测定该制剂粒径及Zeta电位,观察其微观形态并进行差示扫描量热分析、X射线衍射分析、红外光谱分析、物理吸附分析;测定该制剂在不同pH条件下(pH5.0、pH7.4)及不同谷胱甘肽浓度下(0、2、5、10 mmol/L)DOX的体外释放度;考察该制剂对耐DOX型乳腺癌细胞MCF-7/ADR摄取、迁移、凋亡、周期及P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。结果 CLMSNs-SS-NH_2@DOX/siRNA结构清晰,表面脂膜层明显,粒径为(197.63±3.75)nm,Zeta电位为(20.64±0.98)m V,理化性质良好。体外释放结果显示,CLMSNs-SS-NH_2@DOX/siRNA具有良好的p H/还原双重响应释药特性。细胞实验结果显示,经CLMSNs-SS-NH_2@DOX/siRNA干预后,MCF-7/ADR细胞的药物摄取显著增强,迁移率和P-gp表达水平均显著降低,总凋亡比例和G_0/G_1期所占比例均显著升高(P<0.05)。结论 本研究成功制备同时负载DOX和siRNA的CLMSNs-SS-NH_2@DOX/siRNA;该制剂理化性质良好,具有pH/还原双重响应释药特性,且可通过下调P-gp表达逆转MCF-7/ADR细胞多药耐药。