自噬相关基因5在肝癌组织中的表达及临床意义

摘要

背景与目的:肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是死亡率极高的原发性肝癌,其恶变的机制目前尚未明确.近些年随着对自噬研究的深入,发现自噬可以提供肿瘤生长高能量的需求,增加肿瘤细胞对极端低氧、化疗药物等环境的适应性,因而与肿瘤的恶性进程关系密切.该研究旨在探讨自噬小体形成中泛素样连接系统Atgl2-Atg5-Atgl6参与自噬的关键因子,自噬相关基因5(autophagy-related gene 5,Atg5)在HCC组织中的表达及与临床病理参数的关系.方法:回顾性分析中国医科大学肿瘤医院于2015年3月-2017年6月进行肝癌手术切除的110例已确诊无误的HCC标本,免疫组织化学染色检测110例癌旁及HCC组织中Atg5蛋白的表达,同时分析HCC组织中Atg5蛋白表达与患者临床病理学特征之间的关系.蛋白质印迹法(Western blot)与实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)分别检测46例癌旁和HCC组织中Atg5蛋白及mRNA的表达.结果:免疫组织化学结果显示,HCC组织Atg5蛋白的阳性率71.82％ (79/110),明显高于癌旁组织的阳性率20.09％ (23/110),差异有统计学意义(P＜0.05).HCC组织Atg5蛋白水平与肿瘤直径、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)及血管侵犯相关(P＜0.05),肿瘤直径大于等于5 cm、AFP水平大于等于200 ng/mL且合并血管侵犯HCC患者的Atg5蛋白水平较高.Western blot结果显示,HCC组织Atg5蛋白水平为1.25±0.25,癌旁组织为0.47±0.12 (P＜0.05).RTFQ-PCR结果显示,Atg5 mRNA在HCC组织中的表达相当于癌旁组织的4.37倍(P＜0.05).结论:HCC组织中Atg5的基因表达和蛋白水平均显著增加,HCC组织的发生、发展可能与Atg5自噬活性的激活有关.