遗传工程化细胞在小鼠体内长期产生和递送抗肿瘤重组蛋白

摘要

目的:探索荷载含Icon基因小鼠纤维母细胞的免疫隔离装置在体内长期产生和递送肿瘤基因疗法重组免疫偶合Icon蛋白的可能性.方法:Icon基因质粒稳定转染小鼠纤维母细胞(NIH3T3/Icon)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO/Icon),经免疫沉淀法、亲和层析法、Western blot筛选高效稳定表达的NIH3T3简称(NIH3T3/Icon)和CHO简称(CHO/Icon)细胞克隆;FACS测定其生物活性;选用NIH3T3/Icon细胞质入免疫隔离装置里并移植入小鼠皮下,采用荧光-ELISA检测小鼠血浆Icon中的浓度.结果:NIH3T3/Icon细胞表达Icon蛋白的产量为CHO/Icon细胞产量的23倍,但生物活性前者为后者的5%～6%.含NIH3T3/Icon细胞的免疫隔离装置(TheraCyte)在移植入小鼠体内后的第7天至第39天,在小鼠血浆中可检测到高水平Icon蛋白,其浓度维持在120～150 ng/ml;此后,其Icon蛋白水平开始下降,在第53天时的血浆浓度为50 ng/ml,至第59天时血浆中无可检测的Icon蛋白.而在对照组,在小鼠血浆中无可检测的Icon蛋白.结论:NIH3T3/ICON细胞的免疫隔离装置在移植入小鼠体内后可较长时间产生和递送具抗肿瘤作用的重组Icon蛋白.