高效液相色谱法测定魔芋精粉中葡甘聚糖的含量

摘要

目的 建立HPLC方法测定魔芋精粉中葡甘聚糖(konjac glucomannan,KGM)含量,并对高效液相色谱(HPLC)法与比色法测定结果进行比较.方法 魔芋葡甘聚糖用2.5 mol/L的H2SO4溶液110℃水解2h,生成D-甘露糖、D-葡萄糖,经与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)反应得到衍生物.HPLC法中采用的色谱柱为TOSOH TSK-GEL ODS,流动相A(乙腈)∶流动相B(0.45 g磷酸二氢钾、0.5 ml TEA、100 ml乙腈、900 ml纯水混合,pH=7.5)进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长250 nm,柱温30℃;比色法参照GB/I 18104-2000进行测试.结果 HPLC法测定中D-甘露糖和D-葡萄糖分别在21.2～159.3 μg(r=0.9998)和21.5～154.2 μg (r=0.9999)范围内线性关系良好;KGM平均回收率为98.9％,RSD为2.2％.与比色法比含量少5％～7％.结论 HPLC法与比色法相比测定KGM含量更准确,可更好地用于魔芋精粉质量控制和分级.