匹伐他汀对人主动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶9表达的影响

摘要

目的 观察匹伐他汀对入主动脉肿瘤坏死因子( TNF-α)刺激血管平滑肌细胞(VSMCs)基质金属蛋白酶9(M MP-9)表达的影响.方法 研究对象:血管平滑肌细胞取自择期开放手术腹主动脉瘤标本,经洗涤、剪切、消化、离心后培养,实验使用第三代细胞.实验分4组,除对照组外,各组分别加入不同浓度TNF-α(1×103、10×103和100×103 ng/L),孵育24h后,测定MMP-9蛋白和mRNA表达,实验重复3次.实验分为6组,各组均加入TNF-α( 100×103 ng/L),干预组分别加入不同浓度匹伐他汀(0.1 ×103、1×103、10×103、100×103和500×103 ng/L),共同孵育24h,测定各组MMP-9 mRNA和蛋白质表达,实验重复3次.免疫组织化学鉴定为VSMCs.通过蛋白质印迹法检测TNF-α对MMP-9蛋白表达的影响、反转录多聚酶链反应观察TNF-α对MMP-9 mRNA表达的影响以及不同浓度匹伐他汀的干预作用.结果 与对照组比较,不同浓度TNF-α(1×103、10×103和100×103 ng/L)分别使VSMCs、MMP-9蛋白表达约增加71％、113％和116％,mRNA表达分别约增加27％、42％和80％.TNF-α呈剂量依赖方式刺激VSMCs MMP-9 mRNA和蛋白表达,差异有统计学意义(P＜0.01)；与对照组相比,不同浓度的匹伐他汀(0.1×103、1 ×103、10×103、100×103和500×103 ng/L)分别使TNF-α( 100 ng/L)刺激VSMCs MMP-9蛋白表达降低10.0％、10.3％、22.1％、28.9％和36.7％,高浓度的拮抗作用显示出统计学差异(P＜0.01)；对mRNA表达也显现相似的效果,匹伐他汀各组mRNA分别减少26％、29％、32％、37％46％(P＜0.01).结论 MMP-9在动脉粥样硬化区域过度表达、活性增强,降解细胞外基质、破坏弹力纤维,可加重临床病情；局部TNF-α可刺激MMP-9分布增加有关.匹伐他汀具有抑制TNF-α上调MMP-9表达的作用,有利于延缓动脉粥样硬化进展、稳定斑块,减少以动脉硬化为基础的急性心血管事件的发生.