树突状细胞疫苗对人肺腺癌GLC-82细胞体外杀伤作用的实验观察

摘要

目的通过建立负载人肺腺癌细胞株GLC-82可溶性抗原的树突状细胞（DC）疫苗，探讨应用DC疫苗的致敏特异性杀伤性T细胞（CTL）体外杀瘤细胞的可行性和实验条件，为后期临床应用提供实验依据。方法通过用定量摩尔氯化钾提取法获得人肺腺癌细胞GLC-82的可溶性抗原多肽（TSA），从人外周血单核细胞（PBMC）中用GM-CSF、白细胞介素-4和肿瘤坏死因子-α体外诱导扩增并鉴定获取DC，构建DC疫苗；利用DC疫苗刺激同种异体外周血T淋巴细胞活化增殖，诱导产生具有识别肺癌细胞抗原的特异性CTL的可行性及MTT法检测该CTL对GLC-82、肺癌CALU-6和人红白血病K562细胞的体外杀伤效应。结果人PBMC体外经7d诱导出的DC，经形态学、免疫组化证实具有典型的树突状细胞特性；负载GLC-82抗原的DC疫苗能有效诱导同种异体T淋巴细胞活化增殖产生CTL，最适浓度为1：10；诱导活化的CTL对靶细胞的杀伤活性明显高于未经肿瘤抗原致敏的组。结论诱导培养人外周血PBMC中的Mo可获取大量DC，诱导出的DC功能较强，适宜临床应用；DC疫苗能强烈刺激初始型同种异体T淋巴细胞增殖产生CD8^＋表达增加的CTL；激活的CTL对肺癌靶细胞发挥高效而特异的细胞娄效应,时非肺组织瘤靶细胞也具有非特异性杀伤效应。