腺病毒介导p55γ基因N末端的过表达对胃癌细胞增殖的影响

摘要

目的:通过腺病毒介导,研究磷脂酰肌醇3-激酶p55γ调节亚基N末端24个氨基酸的过表达对胃癌MGC803细胞生长增殖的影响.方法:在HEK293细胞中扩增重组腺病毒Ad-N24-GFP以及空载体病毒Ad-GFP,并进行病毒滴度以及腺病毒对胃癌细胞感染率的测定,免疫印迹方法鉴定重组腺病毒感染MGC803细胞后融合蛋白N24-GFP的表达.通过细胞生长曲线和克隆形成实验观察Ad-N24-GFP对细胞增殖的影响.结果:重组腺病毒经过感染HEK293细胞后大量扩增,病毒滴度测定为1.0×1010 pfu/ml,重组腺病毒对MGC803细胞的感染率在感染复数(MOI)为100时最强.与空载体细胞相比较,N24-GFP的高表达明显抑制MGC803细胞的生长,且抑制程度随病毒感染复数的增加呈逐渐增强的趋势;感染Ad-N24-GFP组细胞的克隆形成率[(28.30±3.25)%]明显低于对照组细胞[(42.16±2.84)%,P＜0.05].结论:腺病毒介导N24p55γ基因的过表达能抑制胃癌细胞MGC803的增殖,其在胃癌基因治疗上可能具有潜在的应用前景.