靶向VEGF165多模态分子成像探针制备与体内外靶向成像研究

摘要

目的 构建肿瘤血管内皮生长因子-165(VEGF165)靶向多模态分子探针CY5.5-VEGF165-Aptamer-USPIO,观察其体内、外对VEGF165靶向结合能力.方法 用N-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺与N-羟基琥珀酰亚胺交联剂将USPIO与CY5.5-VEGF165-Aptamer连接;利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CY5.5-VEGF165-Aptamer与VEGF165的体外结合能力.建立BEL-7402腋下肝癌荷瘤鼠模型,设计实验组尾静脉注射CY5.5-VEGF165-Aptamer-USPIO,对照组注射CY5.5-US-PIO,多时间点采集图像,选感兴趣区测量荧光强度,观察两组异同.设计实验组与对照组行MR平扫及多时间点增强扫描,观察两组肿瘤光学及MRI信号强度改变差异.结果 CY5.5-VEGF165-Aptamer-USPIO探针理化性质符合对比剂的要求,粒径小于30 nm,饱和磁化强度是35 emu/g左右,Cy5.5发射波峰在707 nm附近.ELISA实验表明CY5.5-VEGF165-Aptamer-US-PIO仅能与VEGF165结合,而不能与VEGF121结合.荧光图像显示实验组尾静脉给药1 h后出现轻度强化,强化峰值为3 h,6 h强化作用消失.MRI图象表明荷瘤鼠实验组肿瘤在3 h出现明显负性强化,6 h强化作用消失,而对照组相应时间点无强化效应.结论 CY5.5-VEGF165-Aptamer-USPIO能在体内、外与VEGF165特异性结合,可望用于VEGF165在体靶向荧光及MRI成像.