LC-MS同时测定大鼠脑脊液中谷氨酸和γ-氨基丁酸的方法研究

摘要

建立LC-MS同时检测大鼠脑脊液中谷氨酸和γ-氨基丁酸的方法.采用安捷伦ZORBAX SIL(4.6 mm×250 mm×5 μm)硅胶正相色谱柱,流动相为甲醇-水(0.1％甲酸)=50∶50(v/v),梯度洗脱,流速为1 mL/min.电喷雾离子源(eletrospray ionization,ESI)采用正离子化方式,以多重反应检测(multiple reaction monitoring,MRM)方式进行检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 148.1→mr/z 84.1(谷氨酸,[M+H]+),m/z 104.1→m/z87.1(γ-氨基丁酸,[M+H]+).测定大鼠脑脊液中谷氨酸在500～2 500 μg/L和γ-氨基丁酸在50～250 μg/L质量浓度范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系.该方法简便、准确、灵敏度高,专属性强,重复性好,适用于脑脊液中谷氨酸和γ-氨基丁酸的同时测定,可为氨基酸类神经递质提供有效的检测手段.