心肌缺氧状态下间充质干细胞对巨噬细胞M2极化的影响及其机制研究

摘要

目的 探讨心肌缺氧状态下间充质干细胞(MSC)对巨噬细胞极化的影响,并揭示其调控巨噬细胞极化的机制.方法 在M0型巨噬细胞培养液中加入无糖无氧培养的心肌细胞上清液,与MSC共培养.采用流式细胞术、Western blotting及逆转录聚合酶链反应检测M1/M2型巨噬细胞生物学标志,以判断MSC在模拟心肌缺氧状态下对巨噬细胞极化的影响,并观察MSC对巨噬细胞髓样分化因子88及其上游TLR2、TLR4受体表达的影响,以及其下游的细胞核转录因子-κB(NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路磷酸化的水平.结果 与M0组比较,模拟心肌缺氧状态下培养的M0巨噬细胞成功诱导M1极化(P<0.05);与MSC共培养促进M1向M2极化(P<0.05).同等条件下加入不同浓度髓样分化因子88抑制剂后,与M0+OGD组比较,M2型巨噬细胞比例随着ST2825剂量的增加逐渐升高(P<0.05).与M0+OGD组比较,M0+OGD+MSC组白细胞介素10、转化生成因子-β1表达水平升高(P<0.05).Western blotting检测显示MSC共培养后,巨噬细胞TLR2、TLR4及髓样分化因子88表达下调,其下游的NF-κB和MAPK信号通路标志分子P65、IKKAα/β、JNK1/2、P38、ERK1/2等磷酸化水平降低.结论 在心肌缺氧状态下,MSC促进巨噬细胞M2极化.其机制之一可能是MSC下调巨噬细胞TLR2、TLR4及髓样分化因子88表达,抑制TLR2/4-髓样分化因子88信号及其下游的NF-κB和MAPK通路.