巨噬细胞炎性反应蛋白3β 复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定

摘要

目的 构建小鼠巨噬细胞炎性反应因子-3β(mMIP3β)的复制缺陷型重组腺病毒(Ad-mMIP3β),并在体外表达MIP3β.方法 通过在细菌BJ5183内同源重组,利用AdEasyTM系统构建Ad-mMIP3β,经过噬斑筛选、PCR鉴定,然后用CsCl不连续密度梯度离心纯化.利用RT-PCR和Western blot方法研究Ad-mMIP3β的体外表达情况.结果 成功构建了MIP3β的复制缺陷型重组腺病毒,并检测到分泌到胞外的MIP3β蛋白.结论 MIP3β的复制缺陷型重组腺病毒构建成功,为下一步的肿瘤基因治疗研究奠定了基础.