一种从骨髓中分离胚胎样干细胞的技术方法

摘要

目的 建立从成体骨髓中分离胚胎样子细胞的技术方法.方法 采用密度梯度离心法从成体骨髓中分离单个核细胞,运用胚胎干细胞扩增用的无血清knockout-DMEM培养基在明胶包被过的培养瓶中扩增培养,光学显微镜下观察细胞形态特征,分别采用免疫荧光染色和RT-PCR方法鉴定多潜能干细胞标志的表达.结果 采用无血清培养基在明胶包被过的培养瓶中培养的方法,可从威体骨髓中分离到贴壁生长的细胞,这些细胞与传统方法分离到的间充质干细胞相比体积更小、形态纤细均一,传代后均匀分布生长,不易老化,而且这些细胞弱表达多潜能抗原标志Oct-4、Nanog-3和Sox-2.结论 采用扩增胚胎干细胞的技术方法可以从成体骨髓中分离到表达部分多潜能干细胞标志的胚胎样干细胞.