siRNA抑制THOC1基因表达对胰腺癌Panc-1细胞生物学行为的影响

摘要

目的 采用RNA干扰技术下调THOC1基因在胰腺癌细胞Panc-1中的表达,探讨THOC1表达下调对Panc-1细胞生物学行为的影响,以期探讨THOC1基因的功能.方法 构建靶向THOC1基因siRNA慢病毒载体(重组慢病毒中有绿色荧光蛋A真核表达框),感染Panc-1细胞(THOC1 siRNA组),并设立慢病毒载体对照组(Control-siRNA组)及空白对照组.荧光显微镜下观察并计算感染效率,Western印迹检测各组细胞中THOC1蛋白表达水平,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术测定细胞周期,Transwell小室实验检测细胞体外迁移侵袭能力.结果 与Control-siRNA组及空白对照组比较,THOC1 siRNA组的THOC1蛋白表达受到抑制,细胞增殖能力明显减弱(P＜0.01),G1/G2期细胞数增多和S期细胞数减少表明细胞周期受阻、细胞体外迁移和侵袭能力显著减弱(P＜0.01).结论 THOC1基因具有促进胰腺癌细胞Panc-1细胞的增殖和体外迁移侵袭的作用.